非甾体类抗炎药对胃癌化学预防和治疗的实验研究.pdf

表达的变化;应用ELISA方法检测NSAIDs对胃癌细胞SGC7901前 列腺素EZ释放的影响。第三部分:应用裸鼠移植瘤实验，观察 NSAIDs对胃癌移植瘤的抑制作用;应用免疫组织化学方法检测 NSAIDs作用前后胃癌移植瘤COX-2,VEGF及NF-KB表达;结果: 第一部分:胃癌组织中COX一蛋白的表达率95.2% (40/42),15例 为低表达，25例为高表达。阳性细胞主要位于癌细胞浆，呈弥漫 性分布;间质细胞 (单核细胞、内皮细胞和成纤维细胞)和平滑 肌细胞亦可见COX一散在表达。与正常粘膜细胞比较COX-2在胃癌 组织中的表达明显增强 ((P(0.05)aCOX-2在高、中分化型腺癌的 高表达率为81.8%为(18/22)，在低分化腺癌中阳中高表达率为40% (8/20)，二者比较有显著性差异伊0.05)aCOX-2的表达与不同 性别、年龄、病期及有无淋巴转移的患者间无显著差异。免疫细 胞化学及Westernblot证实在胃癌组织及胃癌细胞SGC7901中有 COX-2过表达。第二部分:NM 结果显示尼美舒剂、舒林酸、叫 噪美辛对胃癌细胞均有抑制作用，并随剂量的增加及作用时间延 长，其抑制作用要明显增加;透射电镜观察发现未经NSAIDs作用 胃癌培养细胞的细胞核和细胞器亚微结构清晰，核模完整，而经 不同浓度的舒林酸和尼美舒利作用后细胞呈现典型的凋亡形态学 变化，并可见凋亡小体形成;流式细胞仪结果显示不同浓度的尼 美舒利、呵噪美辛、舒林酸作用SGC7901细胞72h后，均可出现亚 G,峰，呈剂量依赖关系诱导胃癌细胞凋亡，并呈浓度依赖性改变 的细胞周期分布，一方面增高Go/G期细胞比例，另一方面降低S期 和Ga/M期细胞比例;ELISA法显示在SGC7901细胞上清中可测得 PGEZ，加入尼美舒利、舒林酸、叫噪美辛24小时后，PGEZ释放明 显减少，随药物浓度增加PGEZ水平逐渐下降;免疫细胞化学染色 及阳性细胞图象分析仪检测结果表明，尼美舒利、All噪美辛干预 72小时后、胃癌细胞SGC7901COX-2,k卜67及bcl-2的表达呈浓度 依赖性减少;western蛋白印迹反应显示胃癌SGC7901细胞均有 COX-2及Bcl-2蛋白的表达。将显影结果在凝胶图像分析系统上进 行显影强度分析，结果经舒林酸和尼美舒利作用24小时后，细胞 内COX-2及Bcl-2表达明显减低。第三部分:尼美舒利的抑瘤率为 85%、舒林酸的抑瘤率为88.96% 、叫噪美辛抑瘤率为75%，与对 照组比较有显著性差异 ((P(0.01);免疫组织化学结果显示尼美 舒利、舒林酸、叫噪美辛均可使COX-2,VEGF及NF-KB的表达下 调。结论:COX-2在胃癌组织中、胃癌细胞系SGC7901中过表达， 但并不表达在胃癌细胞系MGC803中。提示胃癌细胞存在COX-2表 达的上调，但并非所有的胃癌细胞均有COX-2蛋白的表达，COX-2 可能参与胃癌的发生发展，。COX-2蛋白的表达与胃癌细胞的分化 有关，与年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤分期及淋巴转移无关。NSAIDs 抑制胃癌SGC7901细胞的增殖;NSAIDs促进胃癌SGC7901细胞的 凋亡;NSAIDs抑制胃癌SGC7901细胞前列腺素E2的释放;NSAIDs 抑制胃癌SGC7901细胞COX-2,Bcl-2的表达。NSAIDs抑制胃癌 的机制可能是通过抑制胃癌细胞COX-2的活性，从而抑制前列腺素 E2的释放而抑制胃癌细胞。不同NSAIDs均表现有抑制胃癌裸鼠移 植瘤生长的作用。NSAIDs可能通过下调VEGF表达而抑制肿瘤新 生血管的生成。NF-KB表达与COX-2蛋白表达呈正相关，NSAIDs 可能是通过NF-xB途径抑制COX-2表达，从而抑制胃癌细胞增殖， 促进细胞凋亡;NF-KB表达与VEGF正相关，因而对VEGF可能有 正面调节作用。NSAIDs可能通过影响NF-KB的活性，进而影响胃 癌血管的形成，而起到抑制胃癌的作用。 英文摘要 Stu街 onchemopreventionandrtetmentofgastriccancerwithNonstrroidal Anti-inflammatoryDurgs Tutor:wangjiangbin Speciality:Intemalmedician(pepticulcer) Objective:Toinvestigatetheroleofcycloox