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目 录 ’。,!一-‘z旦,
摘要…………………………………………….………………………………………………………………………………I
英文摘要………………………………………………………………………………………一III
1前言………………………………………………………………………………………………………………………….1
1.1牛肠道病毒概述………………………………………………………………………….2
1.1.1形态结构与理化性质…………………………………………………………………2
1.1.2基因结构及功能………………………………………………………………………3
1.1.3病毒的分类…………………………………………………………………………..4
1.1.4病毒的感染与复制……………………………………………………………………5
1.2牛肠道病毒的流行现状………………………………………………………………….9
1.2.1国外流行现状…………………………………………………………………………9
1.2.2国内流行现状……………………………………………………………………….11
1.2.3牛肠道病毒的检测技术…………………………………………………………….12
1.3RNA病毒的反向遗传学研究……………………………………………………………13
1.3.1反向遗传学概述…………………………………………………………………….13
1.3.2
RNA病毒反向遗传学发展历程……………………………………………………一13
1.3.3反向遗传学在肠道病毒中的应用…………………………………………………一14
1.4本研究的目的与意义……………………………………………………………………16
2材料与方法………………………………………………………………………………………………17
2.1材料………………………………………………………………………………………………………………….17
2.1.1试验动物、病料、血清……………………………………………………………..17
2.1.2细胞、病毒、培养基………………………………………………………………一17
2.1.3质粒与菌株…………………………………………………………………………18
2.1.4酶类与主要试剂…………………………………………………………………….18
2.1.5主要设备和仪器…………………………………………………………………….18
2.1.6试剂配制……………………………………………………………………………19
2.1.7试验参考毒株序列信息…………………………………………………………….19
2.2牛肠道病毒的分离与鉴定………………………………………………………………19
2.2.1病料的处理…………………………………………………………………………19
2.2.2病毒的分离…………………………………………………………………………19
2.2.3病毒TCID50测定……………………………………………………………………19
2.2.4病毒的蚀斑纯化…………………………………………………………………….2l
2.2.5病毒的核酸型鉴定………………………………………………………………….21
2.2.6随机RT-PCR鉴定第一批病料………………………………………………………2l
2.2.7
RT-PCR鉴定第二批病料…………………………………………………………….24
2.2.8病毒的鉴定…………………………………………………………………………24
万方数据
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