鸭源巴氏杆菌、大肠杆菌二联多价蜂胶灭活疫苗研制及其免疫应答反应的动态研究.pdf

摘要 三株分离自发病鸭场，毒力强、免疫原性好的巴氏杆菌但加D22，D23，D157作 为制苗菌株，分别以5％血琼脂培养基和马丁琼脂培养基进行固体表面培养制备 抗原，与蜂胶佐剂高速乳化，制备鸭源多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌二联多价蜂胶 灭活疫苗。通过对供试鸭的攻毒保护试验、用ELISA方法对供试鸭特异性抗体 消长规律的研究以及用MTT法对供试鸭外周血T淋巴细胞免疫水平的检测三个 方面对此疫苗的安全性、免疫原性进行了研究。 安全性检验及最佳免疫剂量筛选结果表明，疫苗安全可靠，疫苗最佳免疫剂 量为4．2×109 ～ 、 存12个月。 攻毒保护试验结果表明，雏鸭首免后第14d时，一次免疫组对E．coil、P．M 的攻毒保护率分别为100％、90％，二免后第14d时，二次免疫组可产生坚强免 疫力，攻毒保护率均为100％。 本研究采用鸭巴氏杆菌、大肠杆菌全菌裂解抗原为包被抗原，建立检测 57： 161sg／mL， 菌抗原最佳包被浓度：D22：lllag／mL，D23：17ttg／mL，D1 0．5I．tg／mL。 免疫鸭抗体消长规律检测结果表明，雏鸭免疫3d后，免疫组四个血清型 E．coli抗体水平均极显著(P0．01)高于空白对照组，二次免疫组抗体水平显著 峰，然后逐渐下降，到第54d时抗体水平仍显著高于首免后第9d相应组抗体水 疫组，首免后20d左右抗体水平达到高峰，然后逐渐下降，到第54d时抗体水 平仍高于首免后第13d相应组抗体水平或相当。 T淋巴细胞转化试验结果表明，E,．coli-P．M-联蜂胶疫苗免疫雏鸭外周血淋 巴细胞转化水平在首免后极显著(P如．01)或显著ftO．05)高于对照组，二次免 疫组的细胞免疫水平比一次免疫组高，维持时间在3周左右。 关键词：鸭，大肠杆菌，多杀性巴氏杆菌，蜂胶疫苗 2 of inactived PreparationbigeminalPolyvalentPropolis vaccineofotduckcgPasteurellateurellamultocidamultociaaand’EscherEschenchta● andstudiesonits immune dynamic response Liu Yi-I抛(Microbiology) Directed Wen-can byProf．Jiang Abstract ThisresearchBseduck Escherichia．coli01、02、018、 pathogenic serotyoes s缸ailisof 078and3 PasteurellamultocidaD22，D23．D157whichwereisolatedfrom diseased deador ducks．Thesestrainshad and strongpathogenicitygood usedthemas bacterium,to imrnunogenicity．Wevaccine-makingprepareantigensby culture solidsurface 0n5％b