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麦类作物学报 2009 ,29 (5) :74 1746
J ournal of Triticeae Crop s
玉米磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因高效表达载体
构建及其导入小麦的研究
1 ,2 2 2 2 2 1 2
李 艳 ,许为钢 ,胡 琳 ,张 磊 ,齐学礼 ,张庆琛 ,王根松
( 1. 河南农业大学农学院 ,河南郑州 450002 ; 2 . 河南省农业科学院小麦研究中心 ,河南郑州 450002)
摘 要 : 为获得具有 C4 光合特征的高光效转基因小麦材料 ,利用从玉米中克隆的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶
( ) ( )
P EPC 基因 p ep c , GenBank 接受号为 FJ 4 15327 构建高效双元表达载体 ,通过基因枪介导法将其导入小麦品种
( )
系 中 ,利用 Realtime PCR 方法分析外源基因在转基因植株中的拷贝数 。PCR 和双酶切鉴定表明 ,玉米 P EPC
cDN A 序列已插入双元表达载体 p CA MB IA330 1 中 ,命名为 p 330 1p ep c ;对获得的抗性再生植株进行 PCR 扩增 ,其
中有 342 株扩增出目的条带 ;在选取的 15 株转基因植株中 7 株拷贝数为 1 ,3 株拷贝数为 2 ,2 株拷贝数为 3 ,拷贝
数为 5 、8 和 17 的分别为 1 株 。初步证明玉米 p ep c 基因已整合到小麦基因组中 ,且外源基因在转基因植株中既有
单拷贝插入 ,也有多拷贝插入 ,这为进一步研究该基因在小麦基因组中的功能表达提供了试验材料 。
( )
关键词 : 小麦 ;玉米磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 P EPC ;高效表达载体 ;转基因;拷贝数
( )
中图分类号 :S5 12 . 1 ; S336 文献标识码 : A 文章编号 :1009104 1 2009 05074 106
Construction of a Higheff icient Expression Vector f or Maize
Phosphoenol pyruvate Carboxylase Gene and Its Transf ormation in Wheat
L I Yan1 ,2 , XU Weigang2 , HU L in2 , ZHANG Lei2 , QI Xuel i2 ,
ZHANG Qingchen1 , WANG Gensong2
( 1. Agronomy College of Henan A gricult ural U niver sit y , Zhengzhou , Henan 450002 , China ;
2 . Wheat Research Cent er , Henan Academy of Agricult ural
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