溶藻弧菌转运蛋白TolB的免疫原性及免疫保护性.pdfVIP

溶藻弧菌转运蛋白TolB的免疫原性及免疫保护性.pdf

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生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2015, 31 7 :143-149 溶藻弧菌转运蛋白 TolB 的免疫原性与免疫保护性 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 燏1,2 庞欢瑛   周泽军   张燕飞   李静   邱明生   丁     1,2  吴灶和2,3 简纪常 (1. 广东海洋大学水产学院,湛江 524088 ;2. 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室 广东省教育厅水产经济动物病害控制 重点实验室,湛江 524088 ;3. 仲恺农业工程学院,广州 510225) 摘 要 : 旨在研究溶藻弧菌( )HY9901转运蛋白TolB 作为疫苗候选抗原的可能性,根据已发表的全基因 Vibrio alginolyticus 组序列,设计特异性引物PCR 扩增tolB 的基因全长序列。序列分析显示,该基因 (GenBank登录号JQ846501)全长1 353 bp,共 编码450 个氨基酸残基。BLAST 分析发现,溶藻弧菌tolB 基因与其他已知弧菌的tolB 具有较高的同源性,序列保守,可作为共同 抗原候选蛋白。用原核表达的tolB 蛋白免疫SPF 级小鼠,制备多克隆抗体,ELISA 效价达1 ∶40 000。免疫印迹表明鼠抗tolB 血清 能与诱导后的重组蛋白发生特异反应。为进一步研究 对石斑鱼 ( )的免疫保护性,用TolB 蛋白两次免疫石 tolB Epinephelus awoara 斑鱼,ELISA 检测发现,免疫石斑鱼血清的抗体效价在第4 周达到峰值 (1∶2 048)。攻毒实验结果表明TolB 对石斑鱼的免疫保护 率为76%。结果表明,溶藻弧菌转运蛋白TolB 具有较好的免疫原性和免疫保护性,可作为弧菌亚单位疫苗的候选抗原。 关键词 : 溶藻弧菌 ; 基因 ;免疫原性 ;免疫保护 tolB DOI :10.13560/ki.biotech.bull.1985.2015.07.021 Immunogenicity and Immunoprotection of Translocation Protein B ( ) TolB in Vibrio alginolyticus Pang Huanying1,2 Zhou Zejun1,2 Zhang Yanfei1,2

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