导入nodD-lba串联基因的根瘤菌工程菌株的构建.pdfVIP

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2016-05-13 发布于安徽
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导入nodD-lba串联基因的根瘤菌工程菌株的构建.pdf

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生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第期 2013 8 导入 - 串联基因的根瘤菌工程菌株的构建 nodD lba 李珊珊李海英于冰（黑龙江大学生命科学学院黑龙江省普通高等学校分子生物学重点实验室，哈尔滨 150080）摘要：旨在利用同源序列克隆法，克隆出结瘤相关基因和大豆血红蛋白基因。以串联的方式将和基因 nodD lba nodD lba 连接到启动子的下游，通过DNA 重组技术构建出带有发光酶基因的重组载体pTR-P -nodD-lba 。通过三亲本杂交方法构 lac luxAB lac 建转基因费氏中华根瘤菌（），Western blot 试验证明导入基因能够进行表达。将初始菌株和基因工程菌株侵染大 Sinorhizobium fredii 豆幼苗后进行固氮酶活的测定。测定结果表明，转基因工程菌株均能够提高固氮酶效率，导入串联基因的工程菌株在提高固氮酶活性上比导入和基因的工程菌株高出4% 和15.1%。 lba nodD 关键词：结瘤基因大豆血红蛋白基因费氏中华根瘤菌三亲本杂交 nodD lba The Construction of Rhizobia Engineering Strain of Introduction a - Tandem Gene nodD lba into Sinorhizobium fredii Li Shanshan Li Haiying Yu Bing （，，， 150080 ） Key Laboratory of Molecular Biology College of Life Sciences Heilongjiang University Harbin Abstract: In this study, homology-based cloning was used to clone hemoglobin gene of lba and nodulation gene of nodD. The two genes were ordered joined into downstream of lac promoter and connected by the DNA recombinant technique to constructed expression vector pTR- Plac-nodD-lba m