樟子松外生菌根中NADP-依赖型异柠檬酸脱氢酶的酶学性质的研究.pdfVIP

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2016-05-13 发布于安徽
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生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2015, 31 8 :114-118 樟子松外生菌根中 NADP-依赖型异柠檬酸脱氢酶的酶学性质研究王一超姚庆智朱和平陈丽霞郭欣杨倩倩闫伟（内蒙古农业大学生命科学学院，呼和浩特 010018）摘要：对褐环乳牛肝菌- 樟子松菌根组织、樟子松根组织及褐环乳牛肝菌纯培养菌丝的异柠檬酸脱氢酶（isocitrate dehydrogenase，IDH）进行纯化和酶学性质鉴定。通过硫酸铵分级沉淀及葡聚糖凝胶层析纯化后的IDH 进行SDS电泳检测，并进行3 种来源酶的酶学性质鉴定。菌根组织、根组织及真菌纯培养菌丝NADP-IDH 对NADP+ 的Km 值分别为 10.7 μmol/L、11.4 μmol/L 和22.1 μmol/L；对异柠檬酸的Km 值分别为71.7 μmol/L、79.3 μmol/L 和87.8 μmol/L。最适pH 分别为8.2、8.0 和7.5，略偏碱性。菌根IDH 和根IDH 的最适反应温度为45℃，真菌IDH 的最适反应温度为42℃。3 种IDH 的活性依赖于不同的二价金属阳离子的存在， 2+ 2+ 2+ 2+ 2+ 2+ Mn 、Mg 存在时酶活性最强，Ca 、Co 、Cu 和Zn 对酶的活性有较强抑制作用。菌根真菌与樟子松形成外生菌根之后异柠檬酸脱氢酶的蛋白含量及酶活力都得到了提高。关键词：樟子松；共生菌根；异柠檬酸脱氢酶；酶学性质 DOI ：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2015.08.017 - Enzymatic Characterization of NADP dependent Isocitrate Dehydrogenization in Pinus sylvestris var. mongolica Ectomycorrhiza Wang Yichao Yao Qingzhi Zhu Heping Chen Lixia Guo Xin Yang Qianqian Yan Wei （Inner Mongolia Agricultural University ，Hohhot 010018 ）： The purpose of the work is to purify the isocitrate dehydrogenase（IDH）in mycorrhizal tissue of - Abstract Suillus luteus Pinus sylvestris var. mongolica, root tissue of P. sylvestris var. mongolica and cultured fungal mycelia of S. luteus, and identify their enzymatic characterizations. The IDHs of 3 sources were purified by ammonium sulfate precipitation and glucan gel chr