人感染H7N9禽流感病毒全基因组扩增与测序方法的建立.pdfVIP

中 国人 兽共 患病 学报 2015，31 (9) ChineseJourna1ofZoonoses 795 DOI：10．3969／j．issn．1002—2694．2015．09003 人感染 H7N9禽流感病毒全基因组扩增 与测序方法的建立 谢剑锋 ，赵 琳 ，张炎华 ，翁育伟 ，陈 炜 ，王金章 ，何文祥 ， 吴冰珊 。，黄 萌 ，黄枝妙 ，朱 颖 ，郑奎城 。，严延生 。 摘 要 ：目的 为 了解人感染 H7N9禽流感病毒基 因特征从而更有效地 防控疫情，需建立获得人感染 H7N9禽流感病毒全 基 因序列的扩增和测序方法。方法 采用鸡胚分离 HTN9禽流感病毒 ，提取标本和毒株病毒 RNA，自行设计 引物，通过一步 法RT—PCR扩增其全基 因组片段 ，纯化PCR产物后测定核苷酸序列，利用生物信息学软件拼接各节段序列并初步分析其特 征 。结果 本研究中的引物能特异地扩增各基 因的 目的片段 ，通过序列