肠侵袭性大肠杆菌DPO-PCR检测方法的建立与应用.pdfVIP

中国人兽共 患病学报 826 ChineseJournalofZoonoses 2015，31 (9) DOI：10．3969／j．issn．1002—2694．2015．09．009 肠侵袭性大肠杆菌DPO—PCR检测方法的建立与应用 李丹丹 ，徐 义刚。，邱索平。，王 昱 ，高会江 ，高慎阳 摘 要 ：目的 为建立肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)的DPO—PCR快速检测方法 。方法 本研究 以EIECipaH 基 因为靶基 因设计 了一对双启动寡核苷酸(DPO)引物，建立 了EIECDPO—PCR检测方法。结果 退火温度范围在 47~C～67~C内都能有 效地扩增 出目的基 因，表 明该检测方法对退火温度不敏感 ；该 DPO 引物仅与 EIEC的扩增反应呈阳性，而与其他菌株无非特 异性扩增反应 ，表 明该方法特异性强；该方法的灵敏度为l_17×10cfu／mL。利用该检测方法对采集 的230份样 品进行检测， 共计检 出3份 EIEC阳性样 品，与国标法 (GB4789．6-2003)检测结果一致