南开大学微生物遗传学MG第一.pptVIP

第一章 微生物的遗传物质 第一节、证明遗传物质是DNA的经典实验 第二节、原核生物染色体及其复制 第三节、真核生物染色体的组成和结构 第四节、基因结构与基因组 第一节 证明遗传物质是DNA的经典实验 1928 ~ 1943 1．转化实验（Transformation） 第一步：1928年, F.Griffith, Diplococcus pneumoniae, In vivo 活的R型＋杀死的S型 注射小鼠 小鼠死亡 从死亡小鼠中分离出活的S型细胞 (图) 第二步：1930~1931年, H.P.Robert Sia, M.Dawson In vitro 活的R型＋杀死的S型 分离出活的S型细胞 第三步：1933年, L.Alloway Cell frell 杀死的S型 石英沙磨碎 过滤 上清液 （Cell frell抽提物）＋活的R型 活的S型细胞 第四步：1940～1944年, O.T.Avery 分别转化 提取S型细胞的多糖、蛋白、 RNA、 DNA 分别转化R型细胞 只有用DNA(1.6ng)转化可获得 转化子 （图） 2 病毒重建实验（Virus Reconstruction） 1956年， Fraenkel Conrat 实验材料：Tobacco Mosaic Virus (TMV和HR), 94% Protein, 6% RNA 1) 分别提取TMV的RNA和外壳Protein 分别提取 HR 的RNA和外壳Protein 2）交替组装重建TMV和HR病毒 3）分别感染烟草 4）观察： A.病症象TMV还是HR ？ B.产生的子代病毒是TMV还是HR ？ 病毒重建实验结果： RNA来自哪一个亲本，病症就象哪一个亲本 RNA来自哪一个亲本，产生的子代病毒也同于哪一个亲本 第二节 原核生物染色体及其复制 一、原核生物染色体数目及大小 二、细菌染色体的结构 E.coli DNA 全长约1300μm，是菌体细胞的1000倍。1997年完成基因组全序列测定，大小为4.7x106 bp, 包括基因4100个。 超螺旋，高度折叠。 参与DNA折叠的类组蛋白（histone-like protein）种类： FIS: factor for inversion stimulation H-NS: histone-like nucleoid structory protein HU: heat-unstable nucleoid protein IHF: integration host factor 特点: 1 高度压缩,多层折叠 E.coli 细胞长度为3~5μ ,其DNA长约1300μ。 2 许多基因有多个拷贝 E.coli复制DNA所需的时间长于细胞世代时间,因此当第一个复制周期尚未结速, 第二个第三个复制周期已经开始 三、细菌染色体的复制 θ型复制 与DNA复制有关的酶和蛋白 染色体复制起点和复制起始阶段 染色体复制终止 E.coli DNA θ型复制 E.coli DNA为环形分子 每一个相继的复制周期从一个固定的起点(oriC)开始 双向复制 证明: 遗传学方法, 放射自显影方法  1. θ型复制 四、细菌染色体的分离机制 五、细菌质粒和噬菌体DNA的滚环复制 单链DNA phage 基因组复制特点: ?X174 DNA复制: SS RF, RF RF, RF SS 复制方式为单向不对称 复制是半保守的 复制过程中仅涉及两条亲链中的一条,另一条亲链始终为环状,保持一套完整的遗传信息 第三节 真核生物染色体的组成和结构 一、组成和结构 核小体（Nucleosome）:由双链DNA和组蛋白构成的染色体基本单位。中心为四种组蛋白各2分子的8聚体，外围缠绕着DNA分子，两个核小体之间的DNA与1分子的H1组蛋白结合。多个核小体连接起来形成染色质，染色质浓缩、反复折叠便成为一定形状的染色体。酵母菌核小体结构中无H1组蛋白。 二、复制特点 真核生物细胞的生活周期分为4个时期： G1期： 复制预备期 S期： 复制期 G