幽门螺杆菌OipA蛋白和Hp相关性疾病的关系.pdf

上海交通大学硕士论文 幽门螺杆菌OipA 蛋白与Hp 相关性疾病的关系 摘 要 [目的]前炎症外膜蛋白（outer inflammatory protein A ,OipA ）是幽门 螺杆菌（Helicobacter Pylori,Hp ）外膜蛋白之一，也是Hp致病因子之一， 本研究检测Hp致病因子OipA在Hp相关性疾病中检出率及OipA mRNA的 表达情况，分析OipA和Hp相关性疾病的关系，了解OipA在Hp相关胃癌 发生发展过程中的作用。 [方法] 1.联合运用窄带成像（Narrow-Band Imaging ，NBI ）放大胃 镜、放大染色胃镜（Magnifying chromoendoscopy ）及超声胃镜（Ultrasonic Endoscopy ，EUS ）检查选择实验样本：对至消化内镜诊治部进行检查的 患者进行筛选，将有 Hp 相关性疾病患者的胃黏膜组织作为实验样本。 对怀疑胃癌及癌前病变病例的筛选联合应用NBI 放大胃镜、放大染色胃 镜、EUS 检查。将 Hp 阳性的实验样本分为五组：十二指肠球部溃疡组 （40 例），慢性胃炎组（40 例），胃癌前病变组（12 例），胃癌组（20 例）， Hp 阴性组（20 例，其中十二指肠球部溃疡10 例，胃炎5 例，胃癌5 例） 作为阴性对照组。2.提取细菌细胞总RNA 并进行RT-PCR ：用Trizol 抽 提法提取细菌细胞总RNA 作为模板。抽提后产物的用分光光度仪测定其 光吸收值并行电泳检测抽提结果。对经检测合格的RNA 模板进行逆转录 －聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction ， 上海交通大学硕士论文 RT-PCR) ，在模板中加入目的基因引物同时加入Human β-actin 引物作为 内参，产物进行电泳后获得OipA 检出率及用OipA 与β-actin 密度定量 值（A ）百分比值表示各实验样本中OipA mRNA 水平。 [结果] 1.应用NBI与放大染色胃镜诊断胃癌及癌前病变：放大胃镜 检查发现胃小凹分型（pit pattern ）pitⅢ以上的40例患者，其中男22例， 女18例，年龄18-70岁，平均年龄：44.2±17.3岁，经病理证实胃癌5例（早 期胃癌3例），癌前病变12例，用NBI放大胃镜、放大胃镜及放大染色胃 镜对胃小凹清晰度的观察比较后发现：NBI放大胃镜明显优于两者 （P0.05 ），NBI放大胃镜对胃癌及癌前病变的诊断准确性、敏感性、特 异性则与放大染色胃镜比较无显著差异（P0.05 ），NBI放大胃镜与放 大染色胃镜对胃小凹分型的观察结果无明显差异（P0.05 ）。2.OipA mRNA在Hp相关性疾病中的表达情况：通过RT-PCR法检测OipA mRNA 在132例Hp相关性疾病患者的胃粘膜组织中的表达，其中男74例，女58 例，年龄15-75岁，平均年龄：50.3±16.4岁。实验发现在十二指肠球部溃 疡组中OipA阳性检出率为92.5 ％（37/40 ），而在慢性胃炎组中的检出率 为52.5 ％（21/40 ），在胃癌组中检出率为90.0 ％(18/20)，在胃癌前病变 组中检出率为66.7% （8/12 ），在Hp 阴性组未检出OipA ；OipA mRNA在十 二指肠球部溃疡组和胃癌组中表达较其他组增加（P0.05 ）。 [结论] 1.NBI放大胃镜及放大染色胃镜可观察胃小凹pit分型，并可 对pit分型可疑部位进行定点活检，有助于提高胃癌及癌前病变的检出率。 上海交通大学硕士论文 2.应用NBI放大胃镜及放大染色胃镜均可提高病变的检出率，NBI放大胃 镜检查对胃癌前病变及早期胃癌的检出率高于放大染色胃镜，无统计学 差异；但NBI 内镜操作简便，耗时少，观察图像清晰。3.OipA在十二指 肠球部溃疡、胃癌、胃癌前病变中检出率较慢性胃炎增高，OipA mRNA 在十二指肠球部溃疡组和胃癌组中表达增加。 关键词：幽门螺杆菌，OipA ，胃癌，窄带成像技术，放大染色胃镜 上海交通大学硕士论文 THE RELATIONSHIP BETWEEN OIPA PROTEIN OF HELICOBACTER PYLORI AND HP-ASSOCIATED