浅谈高效液相色谱在食品检测中的应用详解.docx

分析化学期中论文——浅谈高效液相色谱在食品检测中的应用  PAGE \* MERGEFORMAT6 浅谈高效液相色谱在食品检测中的应用 摘 要: 高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，具有高效、高灵敏度、高速、高压、流动相选择范围宽等优点，因此在生物化学、药物及食品卫生领域广泛应用，是现代分离测定的重要手段。本文针对液相色谱在食品检测中的应用进行了总结介绍。 关键字：高效液相色谱 食品分析 应用 随着经济的快速发展，生活水平的不断提高，人们对食品不再仅仅满足于温饱，而是有了更高的追求——安全健康。近年来食品安全逐渐成为备受关注的焦点，食品的种类越来越丰富，同时新的食品安全问题不断涌现，严重危害人民群众的身体健康。我人口众多，环境保护意识差，生存环境及质量不高；水源污染导致食源性疾患的发生；水质污染直接影响海产品的卫生质量；农畜业种植养殖源头污染对食品安全的威胁越来越严重；农药、兽药滥用，造成食物中农兽药残留问题突出；食品中添加不符合食品卫生要求的物质而引起的食物中毒等事件屡有发生。这就需要有一套完整的监测监督机制，建立快速调查食源性疾病和监测食品污染的措施和方法。目前很多新型专用的HPLC仪不断出现，如氨基酸分析仪、糖分析仪、离子色谱仪等相继出现。本文就高效液相色谱（HPLC）技术在食品安全分析中的应用概况作一综述。 1. 高效液相色谱的介绍 1.1 高效液相色谱法(HPLC)具有的优点 高效液相色谱法与其他谱法相比具有以下优点：①高分离率(应用10μm以下规则均匀的极细颗粒为固定相，所以传质阻抗小，柱效高,一般在1×103~5×105 n/m)；② 高速(采用2×103 ~ 3×104 kPa的高压输液泵输送液体流动相，使其具有高流速,数分钟至几十分钟可完成试样分析)；③ 自动化操作，重复性高；④高效相色谱柱可反复使用；⑤高灵敏度(广泛使用了高灵敏检测器,只需要试样10-7~10-2 g)。 1.2 高效液相色谱法分类 高效液相色谱法按照分离机制可分为以下4 种： 1.2.1 液-液分配色谱法（liquid-liquid chromatography) LLC 根据流动相和固定相的极性不同又可分为，①正向LLC： 流动相极性<固定相极性， 极性小的组分先流出色谱柱，适合极性物质分离。②反向LLC：流动相极性>固定相极性，极性大的组分先流出色谱柱，适合非极性物质分离。目前主要采用化学键合固定相(即通过固定相的有机基团与载体（硅胶）表面的游离羟基发生化学反应，从而使固定相与载体键合起来) 1.2.2 液-固吸附色谱法（liquid-solid adsorption chromatogramphy） 在吸附色谱中，试样组分分子和流动相分子对吸附剂（固定相）表面产生竞争性吸附，利用组分和固定相吸附力的不同而分离。 1.2.3 离子交换色谱法(ion exchange chromatography) 离子交换剂上可解离的离子与流动相中组分离子进行可逆的离子交换，利用试样中不同组分与离子交换剂具有不同的亲和力而将它们分离。 1.2.4 空间排阻色谱法（凝胶色谱法） 试样中分子量大小不同的组分进入凝胶柱时，组分分子渗入微孔的程度不同，大分子直接从间隙中越过，首先出柱，分子越小，渗入微孔越深，保留值越大，溶剂分子通常最小，最后流出。主要用来分离高分子化合物，如蛋白质、多糖等。 2. 高效液相色谱在食品检测中的应用 2.1 HPLC在食品营养成分分析中的应用 2.1.1食品中碳水化合物的分析 食物中的碳水化合物是人体必需的营养素之一,是人体热能的主要来源。HPLC法不仅操作简便,灵敏度高,而且可以同时测定各种糖，国际上已将HPLC法作为酒类糖份含量测定的仲裁法。【1】目前已有：Harrison 等利用石墨化碳柱色谱( GCC) 分离线性分子阱质谱联用检测的手段建立了分离和鉴定果聚糖异构体的液相色谱—质谱法( LCMSn)方法【4】。许秀敏等【2】用配有示差折光检测器的HP1100，以乙腈：水＝ 75：25 为流动相；汤丽芬等【3】用Waters NH2 柱，以乙腈：水＝ 84：16为流动相，检测食品中的葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖等都取得了很好的分析效果；采用高压排斥色谱法也能快速、简便、准确地分析出香菇中的多糖成分。 2.1.2 食品中蛋白质与氨基酸的分析 蛋白质相对分子质量大，在溶液中扩散系数小、粘度大、易发生变性，这使其色谱分离效果不理想，故准确灵敏地测定食品中蛋白质和氨基酸的含量具有十分重要的意义。已有研究：反相HPLC与各种柱前衍生相结合的氨基酸分析技术发展迅速，显示出各自特有的优越性，构成了具有广泛适用性的现代氨基酸分析技术。不仅使氨基酸能在传统的荧光检测器上进行检测，也能在所有HPLC仪都配备的紫外检测器