第五RNA的转录图.ppt

第一节：基本概念 第二节：原核生物RNA的转录 第三节：真核生物RNA的转录 第四节：原核生物RNA转录后加工 第五节：真核生物RNA转录后加工 第六节：真核生物转录产物中内含子的去除 RNA的类别 RNA合成特征： 前体是ATP、UTP、CTP、GTP 合成方向5’－3’ 一个转录区内，一般只有一条DNA链可以被转录 RNA聚合酶与DNA聚合酶不同 DNA和RNA合成的比较 E. coli RNA polymerase（P67） 转录的真实性取决于特异的转录起始位点 （P70） 只有带σ因子的全酶才能专一结合于DNA上的启动子位点 σ因子的作用只是起始转录，一旦转录开始，它就脱离了起始复合物，而由核心酶负责转录延伸 启动子、转录单元、转录起点（P71） RNA聚合酶与启动子区的识别方式：氢键互补（P72） Pribnow框：－10，RNA聚合酶牢固结合位点 Sextama框：－35，RNA聚合酶初始结合位点 依靠σ因子识别该位点 二、真核生物启动子区的结构（P75）： -25至-35bp的Hogness区（TATA box） -70至-80bp的CCAAT（CAAT box） -80至-110bp的GCCACACCC/GGGCGCG（GC box） 上游启动子元件UPE 下降突变、上升突变 （P75） 增强子（enhancer） TATA区控制转录精确起始 CAAT区和GC区控制转录起始频率 原核生物和真核生物mRNA比较（P78） 原核生物mRNA半衰期短 原核生物——多顺反子；真核生物——单顺反子 原核生物mRNA无5’端帽子结构，3’端没有或只有很短的poly(A)尾；真核生物mRNA有5’端鸟苷帽（鸟苷酸转移酶），绝大多数真核生物3’端有poly(A)尾【 poly(A) 合成酶】 帽子结构使mRNA免遭核酸酶破坏； poly(A)尾是mRNA由细胞核进入细胞质所必需形式 mRNA的分子结构 原核细胞mRNA的结构特点 真核细胞mRNA的结构特点 真核生物mRNA的结构 三、转录终止方式（P85）： 不依赖于ρ因子的终止（茎环结构） 依赖于ρ因子的终止（ ρ因子是否有机会进入RNA链的5’末端并沿RNA链向3’端移动） 四、抗转录终止方式： 破坏终止位点RNA的茎－环结构 依赖于蛋白质因子的转录抗终止（P88） 用DNA-RNA杂交方法证明鸡卵清蛋白基因中存在内含子（P89） RNA的成熟加工（P90） hnRNA到成熟mRNA： 5’端加帽3’端加多聚腺苷酸尾，切除内含子连接外显子 RNA剪接（P91） snRNP（P92图） 可变剪接（P93图） 这种自身催化（或剪切）是将一处已有的磷酸二酯键转变成另一处新的磷酸二酯键，而不需要以高能前体（NTP）的分解为代价合成新的磷酸二酯键。 I I 类内含子的剪接（P95图） 这两种独立的基因产物，不产生共线性的中间产物，而是直接将两个外显子拼接在一起。 拼接产物是Y型结构，而不是套索结构。 反式拼接的机制与顺式拼接的机制无本质不同，仍是一连串的磷酸酯转移反应。 插入U 的两步转酯反应 gRNA的3’-OH攻击mRNA 5’端的3’-OH攻击gRNA的U-U 生成RNA编辑产物(插入一个U) gRNA（少一个U） RNA编辑相继在真核生物和病毒中发现 如小鼠脑中的谷氨酸受体， 哺乳动物载脂蛋白B， 植物线粒体中的细胞色素氧化酶亚基 生物学意义 生物适应的保护措施之一 中心法则的发展：改变DNA的信息 科罗拉多大学Cech等人完成（美） 活性位点 lariat RNA编辑（P94）： mRNA的一种加工方式，导致了DNA编码遗传信息的改变，经过编辑后的mRNA序列发生了不同于模板DNA的变化。 指导RNA（guide RNA） 55-70nt 5’端与RNA转录产物互补 3‘端有5-25个U Y430 5′ 3′ 顺反子 顺反子 顺反子 插入顺序 插入顺序 先导区 末端序列 由先导序列，编码区和末端序列等组成，为多顺反子结构 DNA DNA I P O a b c 转录 翻译 重叠基因 (overlapping gene) 蛋白A 蛋白B 蛋白C 原核细胞mRNA的结构特点 AAAAAAA-OH 5′ “帽子” PolyA 3′ 顺反子 m7G-5′ppp-N-3 ′ p 种类多，拷贝少，序列短，修饰碱基少；由5’帽子结构，非编码区，编码区，非编码区和3’polyA结构等组成，为单顺反子结构；5’帽子结构与蛋白质合成的正确起始有关，可对抗核酸外切酶，3’polyA RNApol