肿瘤抗原致敏DC诱导T淋巴细胞增殖及杀伤效率重点分析.doc

肿瘤抗原致敏DC诱导T淋巴细胞增殖及杀伤效率 【摘要】 目的： 探讨胃癌细胞抗原致敏的树突状细胞（DC）诱导T淋巴细胞 (T lymphocyte) 增殖和杀伤胃癌细胞的效率. 方法： 应用淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞，经重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（rhGMCSF）、重组人白细胞介素4（rhIL4）和肿瘤坏死因子α（TNFα），体外诱导培养获取成熟DC，流式细胞术检测DC表面CD83，CD80，CD86及HLADR表型；同时经重组人白细胞介素2（rhIL2）诱导扩增T淋巴细胞，检测CD3，CD4，CD8及CD56表型. 以人胃癌OCUM2MD3细胞株冻融抗原致敏DC，然后刺激T淋巴细胞，得到肿瘤抗原特异的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）. MTT法检测致敏DC对T淋巴细胞增殖的影响和致敏DC活化的特异性CTL对胃癌细胞的体外杀伤效率. 结果：体外诱导人外周血单个核细胞，可获得大量形态典型、具备强烈刺激增殖能力、且高表达CD80，CD86的DC及高表达CD3的T淋巴细胞；MTT法检测结果发现胃癌细胞抗原致敏DC组刺激T淋巴细胞增殖指数显著高于未致敏DC组和对照组(P0.01)；流式细胞术检测结果发现胃癌细胞抗原致敏DC主要刺激T淋巴细胞增殖为CD8+的CTL（60.58±8.43）%，经胃癌细胞抗原致敏DC刺激后，对胃癌细胞的杀伤效应显著增加，致敏DC组对胃癌