微生物期末考问答题2及答案要点分析.docVIP

1、以EMB（伊红美蓝乳糖琼脂培养基）为例，分析鉴别培养基的作用原理。 鉴别性培养基是在培养基中加入能与某菌的五色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而用肉眼就能将其与其他外形相似的菌落区分。EMB培养基中大肠杆菌，因其强烈分解乳糖而产生大量的混合酸，菌体带H+,故可染上酸性染料伊红，又因伊红与美蓝结合，使菌落呈深紫色。从菌落表面反光还可看到绿色金属闪光。而产酸弱的菌株的菌落呈棕色。不发酵乳酸的菌落无色透明。 2、菌种保藏的原理是什么？菌种保藏方法及其主要特点有哪些？ 菌种保藏是将微生物菌种经长时间的保存，不污染其它杂菌，仍可保持其形态特征和生理性状，减少变异，防止衰老，以便于将来使用。保藏菌种一般是选用它的休眠体，如孢子、芽孢等，并且要创造一个低温、干燥、缺氧、避光和缺 少营养的环境条件，以利于休眠体能长期地处于休眠状态。对于不产孢子的微生物，应使其新陈代谢处于最低状态，又不会死亡，从而达到长期保存的目的。 保藏方法有：（1）斜面低温保藏法：简单易行，代价小，能随时观察保藏菌株是否死亡、变异、退化和染菌。适用于任何微生物，使用、保存均方便，但保存时间仅3个月左右，易使菌退化。 （1） 液体石蜡保藏法：可以防止水份蒸发、隔绝氧气，所以能延长保藏的时间，一般为0.5～1年，但必须自立放在冰箱内，占据较大的空间。 （2） 砂土管保藏法：其特点是干燥、低温、隔氧、无营养物。保存效果较好，制作也简单，比液体石蜡法保存时间长，适用于芽孢杆菌、梭状芽孢杆菌、放线菌和一些丝状真菌的保藏，保藏时间可达数年， 甚至数十年。 3、某突变菌株在基本培养基上无法生长，而在添加了0.1%碱水解酵母核酸后，该菌株能生长。请设计一实验方案以进一步确定该菌株的生长必需物。 该菌株能生长。请设计一实验方案以进一步确定该菌株的生长必需物。 首先，它是核酸营养缺陷型。可采用生长谱法，分别配制缺A、G、C、T和U其中一物的混合液，添加到该菌的基本培养基中，将该菌株分别接入到不同的培养基中，即可判断是哪种或哪几种核苷酸缺陷型。 4、对一未知菌进行革兰氏染色时，怎样才能确证你的操作正确，结果可靠？ 染色的基本步骤：初染－媒染－脱色－复染掌握好每一步的染色时间，特别要掌握好酒精脱色的时间，因此步是最为关键的一步，如果脱色时间长，就会使阳性菌变为阴性菌，反之使阴性菌变为阳性菌，除此外，还应掌握好菌龄（培养24小时为佳）、菌的的涂片、自然干燥、固定、水洗等步骤，才能是其结果准确。 5、连续培养和连续发酵有何优点？但为什么连续的时间总是有限的？ 微生物可长期保持在指数期的平衡生长状态和稳定的生长速率。可简化装料、灭菌、出料和清洗发酵罐等单元操作，从而减少了非生产时间和提高设备利用率；便于自控。产品质量稳定。节约大量的人力、动力、水和蒸汽，且使水、汽、电的负荷均匀合理。恒浊法中的微生物以最高速度生长，生产中可获得大量菌体或与菌体生长相平行的代谢产物。恒化法可用于与生长速率相关的各种理论的研究。其缺点主要使菌种易退化，其次是易染菌，且染菌的危害会较大。这也是连续时间总是有限的根本原因。 6、在微生物培养过程中，引起pH改变的原因有哪些？在实践中如何保证微生物处于较稳定和合适的pH环境中？ 工业生产中保证微生物处于稳定和合适的PH环境，分二大类治标和治本来调节PH环境，治标一般通过加入酸或碱直接来调整，此法见效快，而治本一般加入含氮化合物、糖类物质、调节通气量来调整，此法见效慢，却效果持久。工业生产中经常采用，而加入缓冲剂，一般为磷酸盐或碳酸钙，可以适当调整因代谢而引起的PH值变化。 7、简述细菌性中毒与霉菌中毒的区别？ 食品的感官质量：细菌性中毒－绝大部分无变化霉菌性中毒－有霉变 中毒食品情况：细菌性中毒－污染食品、拼盘 霉菌性中毒－熟食品 潜伏期：细菌性中毒－比较长（2～14h） 霉菌性中毒－比较短（1/2～2h） 症状：细菌性中毒－主要是肠胃症状 霉菌性中毒－对实质性器官有损害 预后：细菌性中毒－预后比较乐观 霉菌性中毒－除赤霉素中毒外一般预后不良 治疗方法：细菌性中毒－有特效疗法 霉菌性中毒－无特效疗法 8、买回一支菌种，准备用于五年的生产，设计如何保藏使用这一支菌种？ （1）将这支菌立即接出斜面，一般可接出30支。 （2）将其中两支接出斜面共60支，仅供当年使用，这其中10支上半年使用，以低温斜面保存即可，每月1～2支。另50支留下半年使用，以液体石蜡保存，每月5～8支。 （3）第一次斜面接种余下的58支全部制成砂土管保存，一般可制成50～60支砂土管，以后每月取一支砂土管供生产使用。第二年看情况每月两支，以保证生产使用。 9、简述细菌总数检测的原理及操作过程。 细菌总数的检测是食品检测中的一项重要指标，其主要原理是应用稀释法，通过平皿计数法，检测单位体积的被测样品中细菌总数