热变性法分离纯化羊血SOD工艺优化 毕业论文.doc

本科毕业论文 论文题目 热变性法分离纯化羊血SOD工艺优化 学 院 生命科学技术学院 专 业 生物技术（动物方向） 毕业届别 2011届 姓 名 指导教师 职 称 甘肃农业大学教务处制 二〇一一年六月 目 录 1 材料与方法 2 1.1实验材料….. 2 1.2 实验仪器与药品.. 3 1.2.1 实验仪器 3 1.2.2 实验药品………….. 3 1.3 实验方法 3 1.3.1 SOD的提取. 3 1.3.2蛋白质含量测定……….. …3 1.3.2.1绘制标准曲线…….. 4 1.3.2.2样品测定 4 1.3.3 SOD酶活力测定….. 4 1.3.4 单因素试验设计.. 4 1.3.5 正交试验设计.. ..5 1.3.6 试验数据处理 6 2 结果与分析 6 .1 蛋白质标准曲线…………..……………………. 6 .2 单因素实验结果与分析 6 .2.1热变性温度对SOD提取的影响. 6 .2.2热变性时间对SOD提取的影响. 2.2.3 Cu2+浓度对SOD提取的影响 7 .2.4丙酮添加量对SOD提取的影响 7 2.3 正交试验结果与分析.. 8 2.4 验证试验结果 10 3 结 论.. 10 参考文献 11 英文摘要 12 致 谢 12 热变性法分离纯化羊血SOD工艺优化 孔志亮 （甘肃农业大学生命科学技术学院 兰州 730070） 摘要：本实验以羊血为原料通过溶血、热处理、离心、沉淀等方法获得SOD提取物，采用单因素试验和正交试验，对影响SOD比活力的主要因素进行研究。结果表明，热变性法适宜分离纯化羊血SOD，优化的最优工艺条件为：热变性温度为65℃，热变性时间为15min，Cu2+浓度为2.6%，丙酮添加量为1.25倍。在此条件下得到的SOD提取物的活力为184.8 U/mL，蛋白质含量为79μg/mL，比活力为2338.9U/mg。此方法操作简单，成本低，适合工厂化生产。 关键词：羊血；SOD；酶活性；热变性 Optimization of xtracting Technology of SOD from Sheep Blood by Heating Denaturation Method Kong Zhi-liang (College of Life Science & Technology, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070) Abstract：SOD was extracted by hematolysis, heating denaturation, centrifugal force and precipitation from sheep blood as raw material. The main factors that influence the yield and vitality of SOD were researched by single factor and orthogonal tests. The results showed that the best condition was 65℃ of heating temperature, 15min of heating denaturation time, 2.6% of Cu2+, 1.25 times of acetone. On the condition, the relative activity of SOD was 2338.9U/mg. These processes are simple and inexpensive and can be applied to industrialized production. Key words：Sheep blood; SOD; Enzyme activity; Heating denaturation 超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)是广泛存在于生物体内的一种金属酶[1]，可催化超氧阴离子(O2-) 与H+发生歧化反应，生成H2O2和H2O，抵御O2-的毒害作用[2]具有抗氧化、抗炎症、抗辐射、抗肿瘤和抗衰老等功能被誉为“人体内垃圾清道夫”，在化