双水相萃取菠萝蛋白酶的工艺研究 毕业论文.doc

毕 业 论 文（设计） 题 目：姓 名： 学 院： 食品科学与工程 专 业： 班 级： 200702 学 号： 指导教师： 2011年6月日 摘要 I Abstract II 1 引言 1 1.1 双水相萃取分离技术 2 1.2 双水相形成机理 2 1.3 影响物质分配平衡的因素 2 1.4菠萝蛋白酶在PEG/(NH4)2SO4双水相体系中的萃取原理 3 1.5 论文研究的主要内容 3 2 材料与方法 5 2.1 实验材料 5 2.1.1 材料 5 2.1.2 设备 5 2.2 实验方法 5 2.2.1 双水相体系的确定 5 2.2.2 相图的绘制 5 2.2.3 蛋白标准曲线的绘制 7 2.2.4 菠萝粗酶的提取 8 2.2.5 PEG/(NH4)2SO4双水相体系的建立 8 2.2.6 双水相萃取操作方法 8 2.2.7 菠萝蛋白酶酶活测定-G.D.U法 9 3 结果与分析 10 3.1 每g菠萝下脚料中含有的菠萝蛋白酶含量及菠萝蛋白酶的活性 10 3.2 不同分子量的PEG/(NH4)2SO4体系相图的制作 10 3.3 PEG的分子量对菠萝蛋白酶的分配系数、相比及酶活回收率的影响 13 3.4 PEG浓度对菠萝蛋白酶的分配系数、相比及酶活回收率的影响 14 3.5 (NH4)2SO4浓度对菠萝蛋白酶的分配系数、相比及酶活回收率的影响 15 3.6 外加盐NaCl浓度的不同对菠萝蛋白酶的分配系数、相比及酶活回收率的影响 16 4 讨论 17 参考文献 18 致谢 19  双水相萃取菠萝蛋白酶的工艺研究 摘要：是典型的巯基蛋白酶，能分解蛋白质肽酯酰胺，本文研究了不同PEG分子量、PEG浓度、(NH4)2SO4质量分数外加盐等因素对菠萝酶活分配实验表明PEG平均分子量1000，浓度1%，(NH4)2SO4浓度1%，pH为7.0，室温的情况下，其分配系数达到3.，酶活性回收率可达9%，加入一定浓度NaCl对菠萝蛋白酶活性影响，而加入MgCl2和CaCl2明显使菠萝蛋白酶活性降低。 关键词：双水相聚乙二醇菠萝酶萃取 Study on the extraction of bromelain by aqueous two-phase system Abstract：Bromelain the acysteine ??proteinase enzyme which had the most typical and a very wide range of application. It could decompose protein, peptide, ester, amide. Aqueous two-phase extraction (ATPE) was a new technology which had the advantage of mild operation state, large capacity, continuous processes over traditional extraction in biological separation. so it could be wildly used in bio-separation engineering. The effects of aqueous two-phase system and the proportion into phase composition, operating conditions, diluting ratio on bromelain activity were studied during this paper. In PEG/(NH4)2SO4 two-phase aqueous system, the effects of the molecular weight of the PEG used, the concentrations of PEG and the mass fraction of PEG/(NH4)2SO4 and other