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导 言 一 课程安排 二 课程目的与教学基本要求 三 实验安排的特点 四 教学方式 五、课程作业和考核 六、实验教学管理事项 七、目前工作 一、教学安排 二、课程的目的和基本要求 基础和专业课程知识的综合运用 学习和掌握一系列生物大分子的制备、分离的方法和技术 基因工程常规操作技术 了解并掌握各种常规生化仪器的使用; 在科研素质,如分析和解决问题的能力方面获得培养和训练,为今后独立从事生物技术及相关学科领域的研究奠定基础。 三、实验安排的特点 1-独立性和连贯性 每个实验单元本身既有相对的独立性,单元之间又有紧密的连贯性。即每个实验单元都有实验结果(有产物),上一实验单元的产物是下一单元的材料,联系紧密。每个实验单元的产物要保存好,留作下一单元用。 2、实验具有可行性:所设立的实验方法和策略得当,只要操作正确,就会获得结果。 四、教学方式-共同参与 教师讲授每单元内容,每个同学全程参与,动手操作,包括试剂的配制、仪器的安装、样品的处理 四、教学方式-自主开展 小组制,实行组长制,各组自主开展每个单元的设计和实验,组长负责协调组员与教师的联系(仪器及试剂的领取) 课程作业-实验报告 每做完一项实验需写一份规范的实验报告。 每个同学各自写出有具体数据、符合逻辑推理的实验报告。 能对实验中碰到的问题进行分析并提出解决方法,或对实验方案提出修改。 实验报告要及时交给老师。 如何才能做好实验 充分预习 充分讨论 胸有成竹 充分准备 胆大心细 六、实验教学管理 由于这门课教学内容多,涉及面广,同学们独立操作时间长,有必要建立一系列的分项管理制度,如仪器损坏赔偿、实验室卫生、安全责任制等,更好地督促大家养成良好的学习、工作习惯,保证整个课程教学有序顺利地进行。 管理制度1-以小组为单位保管器具 由于实验是分组进行,每一组都有一套固定的玻璃仪器、层析柱、微量移液器、电泳仪等由各组使用和保管,特别是微量移液器由各组长签领,全部实验结束后再亲自交回老师注销。损坏或丢失要赔偿。 管理制度2-岗位责任制 由于独立实验时长,要求每位同学都 要有很强的责任心,认真、细致做好每一步实验。对仪器的使用、试剂的配制,不懂或不很明确时,要问老师或其他同学,千万不要想当然。组长有协调本组和其它组之间关系的责任。 管理制度3-卫生责任制 注意实验室 的卫生,实验桌面及公共区域要及时清理干净,值日安排表见门后。 管理制度4-安全工作 离开实验室前,必须由任课老师亲自检查合格后,方可离开。值日生记得要关好水阀、电源开关、注意防火、注意人身及钱财安全。 六、目前工作 自由组合,3-4人一大组,两人一小组 选组长,台长; 实验一 大肠杆菌液体培养基和 固体筛选培养基的制备 一、实验目的 1.了解培养基制备的基本原理,掌握培养基制备的方法和步骤。 2.了解灭菌的基本原理,学习并掌握实验室常用的灭菌方法。 二、实验原理 1.按物理状态分: 二、实验原理 三、实验内容 1.配制LB液体培养基、LB固体培养基。 2.准备无菌培养皿。 3.培养基及器皿的高压蒸汽灭菌。 四、实验试剂、耗材和用具 五、操作步骤 药品称量 加水溶解 定容 调pH值 分装 包扎 五、操作步骤 (一)LB液体培养基的配制(50ml体系) 胰蛋白胨0.5g; NaCl 0.5g;酵母提取物 0.25g,双蒸馏水40mL,溶解;定容到50ml,充分混匀;倒入三角瓶中,找老师领封口膜分口。 (二)LB固体培养基的配制(50ml) 分装前如液体培养基,等封装后,50ml的LB液体培养基中加入凝固剂琼脂粉0.75g。 (三)灭菌 严格按照高压蒸汽灭菌的灭菌指标(温度、压力、时间)对培养基、器皿灭菌,确保灭菌彻底。 实验二 大肠杆菌工程菌平板培养 一、实验目的 1.学习掌握微生物培养的原理和方法。 2.建立纯培养技术中的“无菌”概念,学习掌握无菌接种技术。 二、实验原理 消毒:是用较温和的物理或化学方法杀死物体上绝大多数微生物,主要是病原微生物和有害微生物的营养细胞。(化学药剂消毒) 微生物接种技术:是进行微生物实验和相关研究的基本操作技能。包括斜面接种、液体接种、固体接种和穿刺接种等操作,目的是获得生长良好的纯种微生物。 无菌操作:是微生物接种技术的关键。常使用超净工作台(紫外线杀菌、过滤除菌)、酒精灯(火焰灼烧灭菌)、75%酒精。 三、实验内容 1.每小组制备LB琼脂培养基平板1个(无抗生素)、LB琼脂培养基平板(含氨苄青霉素)2个、LB液体培养基25mL两瓶,备用。 2.每人采用平板划线法,培养大肠杆菌单菌落DH5α。 四、实验材料和用具 大
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