肿瘤的基因诊断分析报告.pptVIP

肿瘤的分子诊断 湖南省第二人民医院检验科 李 勇 多基因疾病是指疾病的发生涉及两个以上基因的结构或表达调控的改变。分子诊断是指利用分子生物学和分子遗传学的方法，通过检测基因的存在、结构变异和表达的异常，对人类状态和疾病做出诊断的方法。 肿瘤的分子诊断是指用分子生物学手段，通过检测肿瘤相关基因的存在，分析肿瘤相关基因的缺陷、表达及其功能，以达到肿瘤诊断的目的。 一、肿瘤发生发展的分子机制 一、肿瘤发生发展的分子机制 一、肿瘤发生发展的分子机制 一、肿瘤发生发展的分子机制 Evading apoptosis 一、肿瘤发生发展的分子机制 一、肿瘤发生发展的分子机制 一、肿瘤发生发展的分子机制 一、肿瘤发生发展的分子机制 一、肿瘤发生发展的分子机制 原癌基因 癌基因 病毒癌基因 肿瘤抑制基因 肿瘤转移相关基因 肿瘤耐药基因等 细胞基因组中调控细胞增殖和分化且具有能够使正常细胞发生恶性转化的基因，包括病毒癌基因和细胞癌基因； 癌基因在正常细胞的基因组中 存在 不表达状态 表达水平不足以引起细胞的恶性转化 能够抑制细胞恶性转化或抑制细胞异常 增殖的基因 目前研究较多的有p53基因、pRB基因、p16蛋白、p15蛋白、p21等。 野生型P53生物学活性 当DNA损伤的时候,P53基因就明显表达使细胞在G1期生长阻滞，促使细胞凋亡。 抑制肿瘤细胞生长 保持DNA完整性 包括肿瘤转移促进基因或肿瘤转移抑制 基因。 血小板衍生生长因子（PDGF） 表皮生长因子（EGF） VGF基因等 ? 可分为四大类 组织特异性基因标志 肿瘤特异性基因标志 血管生成因子 其它与肿瘤转移相关的分子及基质蛋白酶及其抑制剂 指肿瘤组织和/或起源正常组织所特有，在淋巴组织和血细胞中不存在的。如角质蛋白家族（CK）mRNA、粘蛋白基因、表皮生长因子受体（EGFR）mRNA等。 存在于肿瘤及其起源的正常细胞中，不存在于其他细胞。 如CEA mRNA、AFP mRNA、PSA mRNA等 如血管内皮细胞生长因子（VEGF）等。 癌基因的突变是癌基因激活的重要方式和途径。除了见到较大范围片段的缺失或插人以及染色体转位之外，大多数情况下，都是少数核苷酸或单个碱基的突变。 . 癌基因点突变的检测 单链构象多态性（SSCP）检测技术等 . EB病毒（EBV） 人乳头瘤病毒（HPV） 乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）感染 PCR、RT-PCR Southern blot杂交技术、Northern blot杂交技术 基因芯片 基因测序。 肿瘤基因的分子诊断意义 1.肿瘤的早期诊断和筛选 2.肿瘤疗效监测 3.肿瘤的预后判断 4.肿瘤微转移检测 肿瘤基因检测在肿瘤微转移检测中应用举例 前列腺癌特异性基因DD3PCA3 DD3PCA3是一种非编码RNA的基因，定位于9q21～22染色体。它为前列腺癌特异性基因之一，DD3PCA3 mRNA仅在前列腺癌细胞中表达，而在其它正常组织和癌组织以及细胞系中均不表达。 谢 谢 ! 血管生成因子 突变的癌基因 肿瘤相关的病毒基因 对于这些肿瘤组织细胞中相关病毒基因及其编 码产物的检测，可以作为这些类型的肿瘤诊断的标志。 致瘤病毒引起的恶性转化作用引起了人们极大的关注 肿瘤基因诊断的常用方法 DD3 mRNA 14外显子扩增结果 M：50bp DNA Ladder；1：LNCaP阳性对照；2 ～ 3：PCa；4：PIN(前列腺上皮内瘤变 )；5 ～ 6：BPH(前列腺增生)；7：直肠癌；8：直肠癌癌旁；9：结肠癌；10：结肠癌癌旁；11：乳腺癌；12：甲状腺癌；13：胃癌；14：胃癌癌旁；15：膀胱癌；16：软组织纤维肉瘤；17：转移性腺癌；18：淋巴结转移性黑色素瘤；19：卵巢成熟性畸胎瘤；20：正常肝脏；21：胆囊；22：胎盘；23：试剂空白。 DD3 mRNA 13外显子扩增结果 M：50bp DNA Ladder；1：LNCaP阳性对照；2 ～ 3：PCa；4：PIN；5 ～ 6：BPH；7：直肠癌；8：直肠癌癌旁；9：结肠癌；10：结肠癌癌旁；11：乳腺癌；12：甲状腺癌；13：胃癌；14：胃癌癌旁；15：膀胱癌；16：软组织纤维肉瘤；17：转移性腺癌；18：淋巴结转移性黑色素瘤；19：卵巢成熟性畸胎瘤；20：正常肝脏；21：胆囊；22：胎盘；23：试剂空白。 * * Molecular?diagnosis of tumors 概 念 肿瘤自身原因 外因 内因 无限增殖 转移 空间 资源 免疫监控 攘外 安内 同流和污 视而不见 肿瘤免疫监控失活 功能丧失 1、 肿瘤自身 1、 肿瘤自身 Limitless repli