高一生物DNA的粗提取.pptVIP

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高一生物DNA的粗提取.ppt

解析:选C。第一次析出DNA是利用DNA在0.14 mol/L 的NaCl溶液中溶解度最低,第二次是为了获得较纯净的DNA,利用的是DNA在冷却的体积分数为95%的酒精中能沉淀析出。 解析:选C。鸡血细胞中的DNA主要存在细胞核中,加入蒸馏水,血细胞及其细胞核可渗透吸水最终涨破,释放出DNA;柠檬酸钠是较好的血液抗凝剂;向滤液中加2 mol/L的NaCl溶液目的是使DNA溶解;用玻璃棒轻轻搅拌,可防止析出的DNA细丝断裂。 解析:选C。加蒸馏水后降低NaCl的溶液浓度,同时逐渐降低DNA的溶解度,使其逐渐变为丝状黏稠物而析出。当NaCl溶液浓度降低时,蛋白质的溶解度增高,即蛋白质的盐溶现象,因而DNA析出时,蛋白质不能析出。 6.以下是以花椰菜为实验材料进行的DNA的粗提取与鉴定实验。 (1)原理: ①在制备DNA时要加入DNA酶的抑制剂柠檬酸钠以除去Mg2+,防止DNA酶的激活。 ②DNA在NaCl溶液中的溶解情况如图。 ③用苯酚处理可使蛋白质变性且留在苯酚层内,在DNA溶液中加入2.5倍体积浓度为95%的酒精可将DNA分离出来,此时DNA十分黏稠,可用玻璃棒搅成团取出。 ④DNA在强酸环境下,水解产生脱氧核糖等小分子物质,它与二苯胺反应生成蓝色化合物。 * * 实验 DNA的粗提取 1.实验原理 (1)DNA提取的原理:DNA在NaCl溶液中的溶解度,随着NaCl浓度的变化而改变。DNA在物质的量浓度为0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。 【实验链接】鸡血细胞中的DNA主要位于鸡血细胞核中,通常先向鸡血细胞液中加入蒸馏水,并搅拌,使细胞膜和核膜涨破,将DNA释放出来,然后用较高浓度的NaCl溶液溶解,再加入蒸馏水降低NaCl溶液的浓度,使DNA析出。 (2)DNA纯化的原理:DNA不溶于酒精,而细胞中某些物质可溶于酒精,从而可提取出含杂质较少的DNA。 (2)DNA纯化的原理:DNA不溶于酒精,而细胞中某些物质可溶于酒精,从而可提取出含杂质较少的DNA。 【实验链接】实验中选用预冷的95%的酒精效果更好,除上述提取方法以外,还可以用苯酚,使蛋白质变性,抑制核酸酶的活性,通过离心分层后,DNA溶于上层水中,蛋白质变性存在于苯酚层中,使二者分开。 2.用品分析 (1)材料:鸡血 实验中用鸡血作为实验材料有三个原因:一是鸡血中血细胞含量高,DNA含量丰富;二是材料易得;三是鸡血细胞极易吸水涨破。 (2)器具 本实验过程中最好使用塑料烧杯和试管。因为玻璃表面带电荷,DNA中的磷酸基也带电荷,因而易被吸附于玻璃表面,故实验中用塑料烧杯和试管可减少DNA的损失。 (3)试剂 在DNA鉴定中所用的二苯胺是一种有毒性的试剂,在使用时注意不要让药液接触到皮肤或身体的其他部位,也不要近距离观察。 3.实验步骤 4.归纳提升 (1)加入抗凝剂的目的 制备鸡血细胞液时要在取新鲜鸡血的同时加入抗凝剂,防止血液凝固。 (2)实验中几次重复操作的目的 ①实验中有两次使用蒸馏水 a.第一次在第2步,目的是使血细胞吸水涨破; b.第二次在第4步,目的是为了稀释NaCl溶液,析出DNA。 ②实验中有三次过滤 过滤时使用纱布层数与取其滤液或丝状物有关。第1、3次要其滤液,使用纱布为1~2层,第2次是要滤出丝状物,使用纱布为多层。目的都是为了获取较多的实验材料。 ③实验中有三次加NaCl溶液 a.在步骤3中加入NaCl溶液,必须充分搅拌,加速染色质中的DNA与蛋白质分离,使DNA充分游离并溶解在NaCl溶液中。 b.在步骤6中加入NaCl溶液的目的也是为了DNA的再溶解,不过这时溶液中蛋白质含量已很少。 c.在步骤9中,加入NaCl溶液的浓度比前两次低得多,但还是为了溶解DNA。 ④实验中有6次搅拌 除第一次搅拌外,后面5次搅拌均要朝向一个方向,并且在析出DNA、DNA再溶解和提取中,搅拌都要轻缓,玻璃棒不要直插入烧杯底部,防止DNA分子断裂。 【例题展示】 关于“DNA的粗提取”实验,部分步骤如图所示。 (1)实验材料选用鸡血细胞液,而不用鸡全血,主要原因是鸡血细胞液中含有较高含量的__________________。 (2)如图A所示实验步骤中加蒸馏水的目的是____________________;通过图B所示的步骤取得滤液,再在溶液中加入2 mol/L NaCl溶液的目的是________________;图C所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是_______________。 (3)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA,可滴加____________溶液,________加热后,丝状物被染成____________色。 【解析】 实验材料选用鸡血细胞液,而不用鸡全血,是因为DNA存在

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