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第三章 酶的应用技术实践第二节 制备和应用固定化酶 苏教版选修1 酶制剂存在的缺陷: 1、通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感,容易失活; 2、溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本; 3、反应后会混在产物中,可能影响产品质量。 如果你是工程技术人员,你如何解决这个问题? 1、解决酶应用中存在问题的方法是? 2、这种方法的优点是什么? 3、制备固定化酶的方法有哪些? 一、固定化酶技术的应用 1、固定化酶技术。即将酶固定在一定空间内的技术(如固定在不溶于水的载体上)。 2、固定化酶技术的优点: (1)使酶既能与反应物接触,又能与产物分离; (2)固定在载体上的酶可以被反复利用。 3、固定化酶的制备方法主要有: 包埋法、化学结合法和物理吸附法。 固定化酶分子小更适合采用化学结合法 和物理吸附法,用包埋法却容易从包埋 材料中漏出。 在生产实际中使用固定化酶技术有无不足?如有不足,怎么办? 有。一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实际中很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能进行,所以操作比较麻烦。 可采用固定化细胞技术。 二、固定化细胞技术的应用 1、概念: 利用物理或化学方法将细胞固定在一定空间的技术。 细胞中含有一系列酶,在细胞正常生命活动的过程中,通过代谢产生所需要的代谢产物。(固定化细胞有点:可催化一系列化学反应) 2.将酶或细胞固定化的方法 将酶(或细胞)包埋在细微网格里 将酶(或细胞)相互连接起来 将酶(或细胞)吸附在载体表面上 包埋法 化学结合法 物理吸附法 酶和细胞固定方法的选择 ①酶适合采用化学结合和物理吸附法固定 ②细胞适合采用包埋法固定 (1)、方法 (2)、原因 ①细胞个大,酶分子很小 ②个体大的细胞难以被吸附或结合而个小的酶容易从包埋的材料中漏出 3、固定化细胞常用的载体 常用的不溶于水的多孔性载体有哪些? 明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、聚丙烯酰胺等 如果反应底物是大分子物质,能否用固定化细胞技术? 为什么? 那应该采用何种技术? 大分子物质难以通过细胞膜,应该用固定化酶技术 练习: 1、使用固定化细胞的优点是( )。 A.能催化大分子物质的水解 B.可催化一系列化学反应 C.与反应物易接近 D.有利于酶在细胞外发挥作用 B 2、酶的固定方法不包括( )。 A.将酶吸附在固体表面上 B.将酶相互连接起来 C.将酶包埋在细微网格里 D.将酶制成固体酶制剂,如加酶洗衣粉中的酶 D 3、如果反应物是大分子物质,采用那种方法催化受限制( )。 A.直接使用酶 B.使用化学方法结合的酶 C.使用固定化细胞 D.使用物理吸附法固定的酶 C 4、下列关于酶和细胞的固定叙述不正确的是( )。 A.酶分子很小,易采用包埋法 B.酶分子很小,易采用化学结合或物理吸附法固定的酶 C.细胞个大,难被吸附或结合 D.细胞易采用包埋法固定 A 5、关于固定化酶的叙述不正确的是 ( )。 A.既能与反应物接触,又能与反应 物分离 B.固定在载体上的酶可被反复利用 C.可催化一系列反应 D.酶的活性和稳定性受到限制 C (固定化细胞) 6、固定化细胞对酶的活性影响最小,根本原因是( )。 A.避免了细胞破碎、酶的提取纯化过程 B.固定化细胞在多种酶促反应中连续发挥作用 C.促化反应结束后,能被吸收和重复利用 D.细胞结构保证了各种酶在细胞内化学反应中有效的发挥作用 D 类型 优点 不足 直接使用酶 催化效率高,低耗能、低污染等。 对环境条件非常敏感,容易失活;溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本;反应后酶会混在产物中,可能影响产品质量。 固定化酶 酶既能与反应物接触,又能与产物分离,同时,固定在载体上的酶还可以被反复利用。 一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的。 固定化细胞 成本低,操作更容易。 固定后的酶或细胞与反应物不容易接近,可能导致反应效果下降等。 类型 优点 不足
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