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吸光度
定量分析 分光光度計 * その1 目的の溶液の吸光度を測ることでその濃度が分かる。 既知の濃度の溶液の吸光度を測定することで、その濃度に対する吸光度が分かる。 では、吸光とは? 入射光:強度 I in 出射光:強度 I out 吸光度(absorbance)とは特定の波長の光に対して物質の吸収強度を示す尺度である。 何が起きているのか? 光:エネルギー 基底状態 基底状態 励起状態 (安定) (安定) (不安定) 光や熱など 入ってきた光(I in)よりも、あるエネルギー分(特定の波長分)通過した光(I out)は弱まって見える。 :電子 :原子核 波長(nm) 光の色 余色(目で見える色) 400~435 435~480 480~490 490~500 500~560 560~580 580~595 595~610 610~750 750~800 吸光度には濃度と距離が関係している I inの50%を吸収 I in I out = 0.5 I in 距離が2倍になると??? I inの50%を吸収 I in I = 0.5 I in I inの50%を吸収 I out = 0.25 I in 距離が2倍になると1/4になる(指数関数的に減少) I inの50%を吸収 I inの50%を吸収 濃度一定の時??? I in I out 距離一定の時??? I in I out = I in×1/L 濃度が2倍になると、2倍ぶつかり易くなるので I out = I in×1/2L I in 濃度が2倍になると1/2になる(比例的に減少) 濃度が一定の時、吸光度は溶液層の厚さに比例する。 ランベルト(ブーゲ)の法則 ベールの法則 距離(光路長)が一定の時、吸光度は溶質のモル濃度に比例する ランベルト?ベールの法則 A(吸光度)=-log( )=εc l I out I in ε :モル吸光係数 c :試料のモル濃度 :試料の光路長 l L N等分する d= L N I d= L N だけ進む間に減衰する光 は、αd I (αは溶液に固有の係数とする) 距離dの前後で減衰する量は I(1-αd)= I(1-α ) L N 光の強さ 距離 ?????????? ???? 各ステップで(1-αd)倍減衰していく、全部でN等分したので (1-α ) L N N 倍減衰する。 (1-α ) L N N Nをだんだん大きくしていくと N→∞ lim N→∞ = (1+ ) L N N lim N→∞ -α 極限値 e の定義より (1+ ) lim N→∞ 1 X X = e (1+ ) L N N lim N→∞ -α = (1+ ) lim N→∞ L N -α αL N - -αL = e -αL 距離Xにおいては、 I(X)=I× e -αX I(X) I e -αX = 両辺対数をとると log I(X) I = -αX log e log I(X) I = k X - 距離に比例することを示せた ただし、数列an=( 1+1/n ) nは収束するとする。 *
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