中药染色补充标准完整版详解.docVIP

内容： 1. 蒲黄—金胺O 1.1 薄层色谱法 1.1.1 仪器： 硅胶G薄层板、微升毛细管点样器、平底展开缸、超声仪、分液漏斗、漏斗、锥形瓶、打粉机、天平。 1.1.2 试剂： 水、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、氨水。 1.1.3 供试品的制备： 取本品粉末2g，加70%乙醇20ml，密塞，超声处理20分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。 1.1.4 对照品的制备： 取金胺O对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照试剂溶液。 1.1.5操作： 照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照试剂溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷—乙酸乙酯—甲醇—氨水（4:5:1:1）的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，立即在可见光下检视。 1.1.6 结果判断： 供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；若出现相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。 1.2 高效液相色谱法 1.2.1 色谱条件与系统适应性试验： 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈—0.025mol/L磷酸二氢钾溶液（含0.2%三乙胺，并用磷酸调PH值3.0）（35:65）为流动相；检测波长为432nm。理论塔板数按金胺O对照试剂色谱中的主峰计算，应不低于2000。 1.2.2 对照试剂溶液的制备： 取金胺O对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml中含50μg的溶液，即得。 1.2.3 供试品溶液的制备： 取上述薄层色谱法项下的供试品溶液，即得。 1.2.4 测定法 取上述供试品溶液和对照试剂溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。 1.2.5 结果判断： 供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱主峰保留时间相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰在320~450nm波长范围的紫外—可见吸收光谱，吸收光谱应不同。 1.2.6 备注： 必要时，可采用高效液相色谱—质谱联用方法验证。建议采用乙腈—0.05mol/L醋酸铵（35:65）流动相系统。 2. 红花—金橙Ⅱ 2.1 薄层色谱法 2.1.1仪器： 硅胶G薄层板、微升毛细管点样器、平底展开缸、超声仪、漏斗、锥形瓶、打粉机、天平。 2.1.2试剂： 水、乙醇、氯仿、甲醇、冰乙酸。 2.1.3 供试品的制备： 取药材粗粉2g，加70%乙醇20ml，超声处理20分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。 2.1.4 对照品的制备： 取金橙Ⅱ对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照试剂溶液。 2.1.5操作： 照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照试剂溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿—甲醇—冰乙酸（7:1:2）为展开剂，展开，取出，晾干，在可见光下检视。 2.1.6 结果判断： 供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；若出现相同颜色的斑点，则用下列高效液相色谱法验证。 2.2 高效液相色谱法 2.2.1 色谱条件与系统适应性试验： 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈—0.025mol/L磷酸二氢钾溶液（含0.2%三乙胺，并用磷酸调PH值3.0）（40:60）为流动相；检测 波长为484nm。理论塔板数按金橙Ⅱ峰计算，应不低于2000。 2.2.2 对照试剂溶液的制备： 取金橙Ⅱ对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml中约含60μg的溶液，即得。 2.2.3 供试品溶液的制备： 取上述薄层色谱法项下的供试品溶液，即得。 2.2.4 测定法 取上述供试品溶液和对照试剂溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。 2.2.5 结果判断： 供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱主峰保留时间相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰在210~550nm波长范围的紫外—可见吸收光谱，吸收光谱应不同。 2.2.6 备注： 必要时，可采用高效液相色谱—质谱联用方法验证。建议采用乙腈—0.05mol/L醋酸铵（35:65）流动相系统。 3. 五味子—胭脂红、赤藓红、酸性红 3.1 薄层色谱法 3.1.1仪器： 硅胶G薄层板、微升毛细管点样器、平底展开缸、超声仪、锥形瓶、打粉机、天平、离心机。 3.1.2试剂： 水、乙醇、乙酸乙酯、正丁醇、氨水。 3.1.3 供试品的制备： 取本品2g（不粉碎），加70%乙醇10ml，超声提取20分钟，离心（3000转/分钟），取上清液作为供试品溶液。 3.1.4 对照品的制备： 取胭脂红、赤藓红、酸性红73对照试剂适量，分别加70%乙醇溶解并制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照试剂溶液。 3.1