基因工程及其应用教程分析.ppt

（二）基因的针线——DNA连接酶 连接切口,催化在两条DNA链的末端形成磷酸二酯键。 六、转基因生物与转基因食品的安全性 　　利用基因工程培育的“指示生物”能十分灵敏地反映环境污染的情况，却不易因环境污染而大量死亡，甚至还可以吸收和转化污染物。 ⑵　环境污染治理：　　基因工程做成的“超级细菌”能吞食和分解多种污染环境的物质。 　　通常一种细菌只能分解石油中的一种烃类，用基因工程培育成功的“超级细菌”却能分解石油中的多种烃类化合物。有的还能吞食转化汞、镉等重金属，分解DDT等毒害物质。 2006年3月14日绿色和平组织发布消息,称亨氏营养米粉含有转Bt基因抗虫水稻成分。  那么转基因食品到底安全吗？什么样的转基因食品才能上市？如何面对市场上的转基因食品呢？? 两种观点 安全：证据 不安全：证据 安全观点： 1.转基因食品与非转基因食品的构成是一样的； 2.减少农药使用、减少环境污染； 3.节省生产成本，降低粮食售价； 4.增加食品营养、提高食品产量等。 不安全观点： 1.可能产生抗除草剂的超级杂草； 2.可能使疾病的散播跨越物种障碍； 3.可能损害农作物的生物多样性； 4.可能干扰生态系统的稳定性； 5.可能产生新毒素和新过敏源。 1）以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来 C 练习 2）有关基因工程的叙述正确的是 （ ） A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成 C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 D 3）有关基因工程的叙述中，错误的是（ ） A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、 限制性内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、 人工合成目的基因不用限制性内切酶 A A C G T G C A T 抗菌素抗性基因 A C G T G C A T 目的基因 A C G T G C A T 提取 培育转基因大肠杆菌的简要过程 普通大肠杆菌 (不能分泌胰岛素) 人体组织细胞 胰岛素基因 与运载体DNA拼接 导入 大肠杆菌(含胰岛素基因) 转基因大肠杆菌 (能分泌胰岛素) 四个基本步骤： 四、基因工程操作的基本步骤 1）提取目的基因 2）目的基因与运载体结合 3）将目的基因导入受体细胞 4）目的基因的检测和表达 目的基因 四、基因工程操作的基本步骤 目的基因是人们所需要转移或改造的基因。 如苏云金芽孢杆菌的抗虫基因，还有植物的抗病（抗病毒、抗细菌）基因、种子贮藏蛋白的基因，以及人的胰岛素基因、干扰素基因等。 步骤一：提取目的基因 目的基因的提取方法 直接分离基因 人工合成基因 鸟枪法 逆转录法 根据蛋白质已知的氨基酸序列合成目的基因 四、基因工程操作的基本步骤 ...... “鸟枪法” 目的基因的mRNA 单链DNA 双链DNA(即目的基因) 逆转录 合成 蛋白质的氨基酸序列 推测 mRNA的核苷酸序列 推测 目的基因的核苷酸序列 化学合成 目的基因 逆转录法 化学合成法 四、基因工程操作的基本步骤 步骤二：目的基因与运载体重组 1）用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个切口，露出黏性末端。 2）用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端。 3）将切下的目的基因片段插入质粒的切口处，再加入适量DNA连接酶，形成了一个重组DNA分子（重组质粒） 目的基因与运载体的结合过程，实际上是不同来源的基因重组的过程。 Bam HⅠ切割反应 GGATCC CCTAGG T4 DNA连接酶 15oC GATCC G G CCTAG + 目的基因用 Bam HⅠ切割 载体DNA用Bam HⅠ切割 重组DNA 运载体自连 目的基因自连 同一限制酶切位点连接 四、基因工程操作的基本步骤 常用的受体细胞： 有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。 将目的基因导入受体细胞的原理 借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。 步骤三：目的基因导入受体细胞 步骤三：目的基因导入受体细胞 注意：当运载体是质粒，受体细胞为细菌时，应