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- 2016-07-04 发布于安徽
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玉米论文:玉米ZmMKK3基因分离功能分析逆境胁迫.doc
玉米论文:玉米B组促分裂原活化蛋白激酶激酶(MAPKK)基因ZmMKK3的分离及功能分析
【中文摘要】MAPK级联途径是真核生物中高度保守的信号通路。MAPK级联途径参与植物生长发育、细胞程序性死亡等的调节,并且能够对不同的环境刺激做出响应,如低温、高温、活性氧、紫外线、干旱和病原菌的侵染等。MAPK级联途径由三个成员组成,分别是MAPK、MAPKK及MAPKKK,此三个信号组分按照MAPKKK-MAPKK-MAPK的方式依次磷酸化,将外源信号级联放大向下传递。近年来,从植物中分离到大量MAPKs,并且对其作用机理的研究也取得了长足进展。不过这方面的研究主要集中在双子叶模式植物,如拟南芥、烟草和紫花苜蓿等,关于玉米MAPK方面的研究相对较少。因此,本文以玉米Zheng958为实验材料,分离到一个B组MAPKK基因,命名为ZmMKK3,对其序列特征、表达模式、以及转基因烟草的抗逆生理功能做了初步研究。主要结果如下:(1)玉米B组MAPKK基因ZmMKK3的分离及序列分析通过对GenBank中关于玉米MAPKK推测的基因信息收集整理,根据整理结果设计特异引物,从玉米幼苗中分离到一段DNA序列,该序列具有植物MAPKK的序列特征,全长为1850bp,并且包含有1686bp的ORF,编码561...
【英文摘要】MAPK cascades are highly conserved modules in all eukaryotes. In plants, MAPK pathways are involved in the regulation of development, growth, programmed cell death and in responses to a diversity of environmental stimuli including cold, heat, reactive oxygen species, UV, drought and pathogen attack. The MAPK cascade is composed of MAPK, MAPKK and MAPKKK. They transfer signals through phosphorylation of MAPKKK-MAPKK-MAPK in turn.In recent years, numerous MAPKs have been isolated from different plants, an...
【关键词】玉米 ZmMKK3 基因分离 功能分析 逆境胁迫
【英文关键词】Zea mays L. ZmMKK3 Gene Isolation Functional Analysis Environmental stress
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【目录】玉米B组促分裂原活化蛋白激酶激酶(MAPKK)基因ZmMKK3的分离及功能分析
符号说明
4-9
中文摘要
9-11
Abstract
11-12
1 前言
13-27
1.1 细胞信号转导
13-16
1.1.1 植物细胞信号转导
13-16
1.2 植物MAPK Cascade 的组成
16-21
1.2.1 植物中的MAPKKK
16-17
1.2.2 植物中的MAPKK
17-19
1.2.3 植物中的MAPK
19-21
1.3 MAPK Cascades 介导的信号转导途径
21-25
1.3.1 MAPK Cascades 参与生物及非生物胁迫的调控
21-23
1.3.2 MAPK Cascades 参与其他信号通路的调控
23-25
1.4 本研究的目的及意义
25-27
2. 材料与方法
27-47
2.1 实验材料
27-29
2.1.1 植物材料
27
2.1.2 菌株与质粒
27
2.1.3 酶及生化试剂
27
2.1.4 PCR 引物
27
2.1.5 培养基
27-29
2.2 材料处理
29-30
2.3 实验方法
30-47
2.3.1 植物材料总RNA 的提取
30-31
2.3.2 反转录cDNA 第一链的合成
31
2.3.3 普通PCR 以及Overlap-PCR 扩增
31-32
2.3.4 连接反应
32
2.3.5 大肠杆菌感受态细胞的制备
32-33
2.3.6 大肠杆菌感受态细胞的转化及阳性克隆筛选
33
2.3.7 质粒DNA 的提取
33-34
2.3.8 质粒DNA 的酶切鉴定
34
2.3.9 DNA 序列测定
34
2.3.10 Northern Blot 杂交分析
34-37
2.3.11 基因
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