病毒感染的检查方法和防治原则教案分析.ppt

病毒感染的检查方法和防治原则 绒毛尿囊膜痘病毒特异性损伤 *包涵体形成的观察 TCID(50% tissue culture infective dose):在半数细胞培养板孔或试管内引起细胞病变（CPE）的病毒量 空斑试验：在细胞培养表面覆盖一层半固体物质使细胞病变形成空斑 第二节 病毒感染的防治原则 一、抗病毒治疗 1. 抗病毒药物或制剂 核苷类药物 阻抑子代病毒结构基因的合成与表达。 病毒蛋白酶的抑制剂 阻止大分子病毒蛋白的降解。 其他：IFN、TNF、IL-2、中草药等抑制病毒复制。 抗病毒基因治疗：asODN、asON、ribozyme 策略：作用于病毒复制周期的不同环节 2.免疫制剂 二、 病毒感染的预防 传统疫苗 1.灭活疫苗 2.减毒活疫苗 现代疫苗 1.基因工程的疫苗 2.核酸疫苗 3.其他类型的疫苗：合成肽疫苗 抗独特型疫苗 联合多价疫苗等 Fig Edward Jenner vaccinating (inoculating) James Phipps with cowpox material. * * 第一节 病毒感染的检测方法 一、病毒分离培养与鉴定： 1.标本的采集与运送 (1)急性期标本； (2)根据感染性质取不同的标本； (3)标本置于转运液中； (4)冷藏快运。 2. 病毒的分离培养 动物接种 鸡胚培养 细胞培养 原代细胞培养 二倍体细胞株 传代细胞系 (1) 原代细胞培养 动物或人组织直接用蛋白酶消化所得 的细胞经体外培养后可贴壁或悬浮生长； (2)二倍体细胞株 在体外连续培养50~60代仍保持其二倍染色体数目的单型细胞。 为生产人用疫苗的首选细胞株。 (3) 传代细胞系 能在体外连续传代、来自癌细胞或发生自发转 化、突变的原代细胞或二倍体细胞株。 3.病毒在细胞内增殖的检测与鉴定 (1)细胞病变效应：cytopathic effect，CPE 病毒感染宿主细胞后，细胞形态的变化，如细胞团缩、肿大、融合等。 Negri Body ? (2)红细胞吸附： 某些病毒感染的宿主细胞能吸附脊椎 动物的红细胞而发生血吸现象。 (3)干扰现象： (4)病毒蛋白、核酸的检测： Fig HSV 荧光抗体法查抗原 4.病毒数量与感染性的测定 蚀斑测定 plaque forming unit/PFU 50%组织细胞感染量 50% tissue culture infective dose TCID50 二、检测病毒的基本组成 蛋白抗原 病毒核酸 PCR cycler 三、检测机体的体液免疫应答： 1、单份血清检测： IgM IgG 2、双份血清检测： IgG 恢复期/早期 4:1 Fig Identification of specific IgM antibody by capture and ELISA. 吸附 拟受体制剂 拟配体制剂 中和抗体 穿入 ?金刚烷胺 脱壳 生物合成 装配、释放 核苷类似物 干扰素 反义技术等 Fig A) HIV attach to a CD4 receptor. B) A soluble synthetic version of the receptor can prevent attachment of the virus. mRNA Protein