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第七章 细菌感染的诊断和防治 病原菌的诊断除可根据临床症状、体征和一般检查外,还可用临床标本做细菌学和血清学检验。 获得性免疫力的产生的是预防、控制感染或传染病的主要方法。其产生方式如下: 第一节 细菌感染的诊断 诊断对象:为致病菌、条件致病菌和新现病原菌。 诊断目的 - 确定病原(病原学诊断要鉴定到种) - 药物敏感试验 一、标本的采集与送捡 严格无菌操作,尽量避免标本被杂菌污染; 根据不同疾病、时期采集不同的标本。 标本采集应在使用抗菌药物前。 标本必须新鲜,尽快送检。 根据病原菌特点,多数病原菌可冷藏输送。 标本作好标记。 二、病原菌的检验程序 感染性疾病:分离鉴定出病原菌是金标准 分离鉴定程序 1、细菌形态与结构检查 显微镜放大法 - 普通光学显微镜 - 电子显微镜 细菌染色检查法 - 革兰染色法 (Gram stain) - 抗酸染色法 (acid-fast stain) 2、分离培养与鉴定 取材:无菌、适宜部位、适时采集的标本 接种于适宜培养基(选择、鉴别或营养培养基) 适宜条件下培养(需氧或厌氧或5%CO2培养) 观察菌落特点、细菌形态特征 生化反应和血清学鉴定 血清学鉴定:用含有已知特异抗体的免疫血清对分离细菌进行属、种和血清型鉴定的方法。 动 物 实 验 非常规检查技术,主要用于病原菌分离鉴定、测定细菌毒力或致病性(毒素抗毒素中和试验)。 常用动物有小鼠、豚鼠和家兔等。 接种途径-有皮内、皮下、腹腔、静脉、脑内、鼻腔和灌胃等。 药物敏感性试验 药敏试验对指导临床正确有效地选择用药,及时控制感染有重要意义。 方法有纸碟法、小杯法、凹孔法和试管法等,以单片纸碟法和试管稀释法常用。 病原菌成分检测 抗原检测 核酸检测(基因诊断) - 核酸杂交技术: - PCR - DNA指纹: - 细菌其他成分检测:用气-液相色谱法可检测细 菌在代谢过程中产生的挥发性脂肪酸谱诊断厌 氧菌感染。 血清学诊断 用已知的细菌或其特异性抗原检测患者血清或其他体液中有无相应特异抗体和其效价的动态变化,可作为某些传染病的辅助诊断。 血清学诊断主要适用于抗原性较强的致病菌和病程较长的感染性疾病。 血清学诊断试验最好取患者急性期和恢复期双份血清标本,当后者的抗体效价比前者升高≥4倍者方有意义。 常用血清学诊断 第二节 细菌感染的防治 一、细菌感染的预防 人工主动免疫 给机体注射病原生物性抗原(包括类毒素)或特异性抗体和细胞因子等,以获得特异性免疫力而达到预防和治疗疾病的目的。 人工被动免疫 输入含有特异性抗体的免疫血清或制备的免疫细胞及其细胞因子使机体立即获得免疫力的过程称为人工被动免疫。 1、疫苗(vaccine) 是用各种微生物制备的用于预防相应传染病的抗原性生物制品。 减毒活疫苗 是通过人工培养使病原菌毒力发生变异或由自然界直接筛选出弱毒或无毒但仍保留抗原性且遗传性稳定的活菌制成。 预防结核的卡介苗(BCG)即用牛型结核分枝杆菌在人工培养基上培养13年,传代230次,制备而成的减毒活疫苗。 预防鼠疫的鼠疫耶尔森菌低毒株即由自然界筛选而出。 灭活疫苗 亦称死疫苗,是将病原菌经人工大量培养后,用物理或化学方法将其杀死而制成。 常用的有伤寒、百日咳、霍乱和流脑等灭活疫苗。 将不同种类的死疫苗适当混合,制成联合疫苗使用,可减少接种次数、获得广泛的免疫效果。目前应用的有伤寒沙门菌与甲、乙型副伤寒沙门菌混合的三联疫苗等 。 活疫苗与死疫苗比较 亚单位疫苗 去除病原菌中与激发保护性免疫无关的甚至有害的成分,保留有效免疫原成分,用化学方法提取或经基因工程生产制作的疫苗。 免疫原性较差,需要与蛋白质载体偶联后使用。如荚膜多糖亚单位疫苗的免疫原性较弱,可与破伤风类毒素、白喉类毒素等结合成偶联疫苗。偶联疫苗用蛋白质作为载体以增强多糖的免疫原性,同时可预防两种以上相应细菌的感染。 基因工程疫苗 是利用DNA重组技术制备的只含保护性抗原的纯化疫苗。 预防痢疾的遗传重组活疫苗即由福氏志贺菌2a株与大肠埃希菌MH株经基因重组后获得的杂交株疫苗。 带有可表达志贺菌表面抗原质粒的伤寒Ty21a株为载体活疫苗,既可预防志贺菌又可预防沙门菌的感染. 核 酸 疫 苗 也称DNA疫苗,是由编码病原体某种抗原的基因和作为载体的质粒 DNA 组成,然后将重组的质粒DNA直接注射到机体内,使外源基因在活体内表达,表达的抗原激发机体的免疫应答。 核酸疫苗不仅能诱导特异性体液免疫,而且能诱导具有细胞毒杀伤功能的T淋巴细胞,可有效预防病毒、细胞内寄生菌等引起的传染病。 2、类毒素 类毒素(toxoid) 细菌外毒素经0.4%甲醛
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