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淮 海 工 学 院 综合大实验报告书 题 目： 生物化学大实验 系（院）： 海洋学院 专 业： 生物技术 班 级： 生技101 姓 名： 陈帅 学 号： 521002101 2011年12月 酶的特异性及温度、pH对酶活性的影响 班级：生技101 姓名：陈帅 学号：521002101 【摘要】 唾液淀粉酶是生物催化剂，在人体内有着重要作用。现代科学研究在酶添加壳聚糖的基础上，开发了一代有创新性的产品加酵素壳聚糖健康食品酶是人体内新陈代谢的催化剂，人体内才能进行各项生化反应它们支配着生物的新陈代谢、营养和能量转换等许多催化过程，与生命过程关系密切碘化钾溶于蒸馏水中，待全部溶解后再加，振荡溶解。 2.2实验方法 2.2.1酶的特异性 ①取两支试管编号1、2，1号加入0.5%的淀粉液2mL,2号加入0.5%的蔗糖液2mL； ②与两支试管各加入制备好的唾液1mL； ③将两支试管同时放入37℃恒温水浴锅中保温； ④15分钟后，取出两试管，各加入Benedict试剂1mL； ⑤将两试管同时放入沸水中煮沸6分钟； ⑥取两支试管，观察记录颜色的变化，并注意是否有红棕色产生。 表1 酶的特异性验证 试剂 管号 1 2 0.5%的淀粉液（mL） 2 — 0.5%的蔗糖液（mL） — 2 制备好的唾液（mL） 1 1 37℃恒温水浴保温15min Benedict试剂（mL） 1 1 沸水浴6分钟→观察记录颜色的变化 2.2.2温度对酶活性的影响 ①取三支试管并编号3、4、5，同时加入5mL0.5%淀粉液及1mL唾液混匀； ②将管3、管4、管5同时分别放入冰浴、37℃水浴、沸水浴中； ③15分钟后，取出各管，分别加入碘液数滴，观察并记录各管颜色变化。 表2 温度对酶活性的影响 试剂 管号 3 4 5 0.5%淀粉液（mL） 5 5 5 唾液（mL） 1 1 1 水浴（15min） 冰浴 37℃ 沸水浴 碘液 数滴 数滴 数滴 2.2.3pH对酶活性的影响[4] ①取试管3支编号6、7、8，按下表加入试剂； ②3支试管同时放入37℃恒温水浴锅内保温； ③15分钟后，取出3支试管，分别加入碘试剂数滴，每加一滴，注意摇匀，观察并记录颜色变化。 表3 pH对酶活性的影响 试剂 管号 6 7 8 0.5%淀粉液（mL） 2 2 2 pH1.5溶液（mL） 1 — — pH6.8溶液（mL） — 1 — pH9.8溶液（mL） — — 1 唾液（mL） 1 1 1 37℃恒温水浴保温15min 碘液 数滴 数滴 数滴 3结果与分析 3．1实验结果 3.1.1酶的特异性 实验现象：1号试管经沸水浴后颜色逐渐变为黄色、棕褐色最终变成砖红色并产生砖红色沉淀；2号试管经沸水浴后颜色没有发生变化(仍为浅蓝色)。（如图1）。 图1 酶的特异性 实验现象表明：唾液淀粉酶能水解淀粉，而不能水解蔗糖。说明唾液淀粉酶具有特异性。 3.1.2温度对酶活性的影响[3] 实验现象：3号试管加5滴碘液并混匀后变成深蓝紫色；4号试管加5滴碘液并混匀后变成酒红色；5号试管加5滴碘液并混匀后变成深蓝紫色。（如图2）。 图2 温度对酶活性的影响 实验现象表明：经过冰水浴和沸水浴后，唾液淀粉酶活性降低，不能将淀粉分解成葡萄糖；而在37℃条件下唾液淀粉酶活性较高，将被淀粉分解成葡萄糖。说明温度对唾液淀粉酶活性有一定影响。温度为0℃（低温）条件下酶活性受抑制；温度为100℃（高温）条件下酶变性失活；而37℃（人体正常温度）条件下酶的活性最高。 3.1.3pH对酶活性的影响[4] 实验现象：6号试管逐滴加入3滴碘液并混匀后变成深蓝紫色；7号试管逐滴加入3滴碘液并混匀后变成酒红色；8号试管逐滴加入3滴碘液并混匀后变成深蓝紫色，但颜色浅于6号试管。（如图3）。 图3 pH对酶活性的影响 实验现象表明： pH为1.5（强酸性）条件下，唾液淀粉酶不能水解淀粉；pH为6.8（接近中性）条件下，唾液淀粉酶活性较高，能水解淀粉；pH为9.8（碱性）条件下，唾液淀粉酶不能水解淀粉。说明唾液淀粉酶水解淀粉的最适pH为6.8左右，pH过大或过小都会影响唾液淀粉酶的活性，使其变性失活。 3.2结果分析 本实验研究酶的特异性及温度、pH对酶活性的影响得到以下结果：比较1、2号试管可知，唾液淀粉酶只能水解淀粉而不能水解蔗糖，验证了酶的特异性，与理论相符。比较3、4、5号试管可知，酶的作用活性受温度的影响，只有在特定温