RNA干扰技术精要.pptVIP

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  • 2016-05-28 发布于湖北
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RNA干扰技术 什么是RNA干扰 RNA干扰(RNA interference,RNAi),又称转录后基因沉默(post-transcriptional gene silencing,PTGS),是指将特异性同源双链RNA(dsRNA)导入到细胞内,使目的基因的不表达或表达水平下降. 目前应用的基因干扰技术 DNA水平的基因干扰技术 基因敲除技术 寡核苷酸与双链DNA 杂交 采用多胺等小分子识别并阻遏特定转录因子 mRNA水平的基因干扰技术 用反义RNA 技术阻遏翻译过程, 破坏内源性mRNA 设计寡核苷酸来破坏与mRNA 结合的蛋白质, 使mRNA 不稳定 双链RNA 干扰技术(RNAi) RNAi的发现和发展历程 1984 年,Jonathan 研究小鼠L 细胞时发现反义mRNA 会干扰同源基因的表达,机制不清 1990年 Jorgensen等 矮牵牛颜色加深实验 “共抑制(co-suppresion)” 1995年 Su Guo 和Ken Emphues 反义RNA阻断秀丽小杆线虫par-1基因的表达 实验 ,首次发现 RNA干扰现象 1998年 Andrew Fire和Craig Mello 发现单链RNA抑制作用较弱,而纯化的dsRNA可高效、特异地抑制基因的表达 Nature1998; 391: 806-11 , 正式提出RNA干扰的概念 2002 年

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