酶工程第十二章酶和蛋白质工程的应用分析.ppt

第十二章 酶工程的应用 第一节 在医药方面的应用 第二节 在食品方面的应用 第三节 在轻工、化工方面的应用 第四节 在能源开发方面的应用 第五节 在环境保护方面的应用 第六节 在生物技术领域的应用 第一节 在医药方面的应用 一、在疾病诊断方面的应用 二、在治疗疾病方面的应用 三、在药物制造方面的应用 一、在疾病诊断方面的应用 （一）根据体内酶活力的变化诊断疾病 （二）用酶测定体液中某些物质的变化诊断疾病 （一）根据体内酶活力的变化诊断疾病 1、酸性磷酸酶 2、碱性磷酸酶 3、转氨酶 4、乳酸脱氢酶 5、乳酸脱氢酶同工酶 6、葡萄糖磷酸异构酶 7、胆碱酯酶 8、端粒酶 1、酸性磷酸酶 酸性磷酸酶（acid phosphatase，EC3.1.3.2） 酸性条件下催化磷酸单酯水解生成无机磷酸的水解酶，pH5-6 37°C 测定：定磷法、测酚法、硝基酚磷酸法 来源骨、肝、肾、脾、胰等组织 前列腺癌、肝炎、甲亢、红细胞病变 活力提高 2、碱性磷酸酶 碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，EC3.1.3.1） 碱性条件下催化磷酸单酯水解生成无机磷酸的水解酶，pH9.5-10 37°C 测定：定磷法、测酚法、硝基酚磷酸法 主要由造骨细胞产生 佝偻病、骨骼软化症、骨瘤、甲亢、黄疸性肝炎 活力提高 3、转氨酶 氨基转移酶（aminotransferase，EC2.6.1） 谷丙转氨酶（GPT）丙氨酸转氨酶（alanine aminotranferase，EC2.6.1.2）催化丙氨酸与α-酮戊二酸反应生成谷氨酸和丙酮酸 谷草转氨酶（GOT）天冬氨酸转氨酶（aspartate aminotransferase，EC2.6.1.1）催化天冬氨酸与α-酮戊二酸反应生成谷氨酸和草酰乙酸 pH7.4 37°C 急性传染性肝炎、肝硬化和阻塞性黄疸型肝炎 GOT、 GPT升高 测定： 二硝基苯肼显色法 4、乳酸脱氢酶 乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH；EC1.1.1.27）催化乳酸脱氢生成丙酮酸的氧化还原酶 测定：丙酮酸与2,4－二硝基苯肼反应 正常情况 低，肝癌、急性肝炎、心肌梗塞 活力增强 5、乳酸脱氢酶同工酶 心肌梗塞、恶性贫血；LDH1增高 白血病、肌肉萎缩；LDH2增高 白血病、淋巴肉瘤、肝癌；LDH3增高 转移性肝癌、结肠癌；LDH4增高 肝炎、原发性肝癌、脂肪肝、心肌梗塞、外伤、骨折；LDH5增高 6、葡萄糖磷酸异构酶 葡萄糖磷酸异构酶（glucosephosphate isomerase，EC5.3.1.9）催化6-磷酸葡萄糖生成6-磷酸果糖 pH7.8 37°C 测定：果糖与间苯二酚 急性肝炎；极度升高 心肌梗塞、急性肾炎、脑溢血；显著升高 7、胆碱酯酶 胆碱酯酶（cholinesterase，EC3.1.1.8）催化胆碱酯水解生成胆碱和有机酸 测定：羟胺显色法 正常情况30-80单位 传染性肝炎、肝硬化、风湿、营养不良；活力下降 8、端粒酶 端粒酶（telomerase）催化端粒合成和延伸的酶 端粒酶是核糖核蛋白，蛋白质和核酸 通过端粒重复序列扩展法（ TRAP）检测 在人体正常细胞（除生殖细胞和干细胞），端粒酶的生物合成和酶活性受到抑制，在分化较低的癌细胞中活性高 （二）用酶测定体液中某些物质的变化诊断疾病 葡萄糖氧化酶——诊断糖尿病 葡萄糖氧化酶和过氧化物酶——诊断糖尿病 尿素酶——诊断肝、肾病变 胆固醇氧化酶——高血脂症 谷氨酰胺酶——肝硬化、肝昏迷 DNA聚合酶——基因诊断、癌基因 酶标免疫检测法——抗体、抗原 二、在治疗疾病方面的应用 1、蛋白酶——消化剂、消炎剂、高血压 2、α-淀粉酶——淀粉引起的消化不良 3、脂肪酶——脂肪引起的消化不良 4、溶菌酶——抗菌、消炎、带状疱疹、流感 5、超氧化物歧化酶——抗氧化、抗衰老、皮肌炎、结肠炎 6、L-天冬酰胺酶——治疗癌症、特别是白血病 二、在治疗疾病方面的应用 7、尿激酶——血栓类、风湿性关节炎 8、纳豆激酶——溶栓 9、凝血酶——出血性疾病 10、组织纤溶酶原激活剂——血栓 11、乳糖酶——乳糖引起的腹胀、腹泻 12、核酸类酶——RNA病毒 其他 三、在药物制造方面的应用 1、青霉素酰化酶制造半合成抗生素 2、 ?-酪氨酸酶制造多巴 3、核苷磷酸化酶制造阿糖腺苷 4、无色杆菌蛋白酶制造人胰岛素 5、多核苷酸磷酸化酶生产聚肌胞 6、 ?-D-葡萄糖苷酶制造抗肿瘤人参皂甙 第二节 在食品方面的应用 一、在食品保鲜方面的应用 二、在食品生产方面的应用 三、在食品添加剂生产方面的应用 四、在改善食品品质和风味方面的应用 一、在食品保鲜方面的应用 食品除氧保鲜（葡萄糖氧化酶） O2＋葡萄糖——H2O