基因工程余洁分析.pptVIP

基因工程 福州一中 生物组 余洁 导言 基因工程的基本工具 基因工程的操作程序 基因工程的实际应用 蛋白质工程 重难点阐析 教学目的：掌握基因工程的基本概念、操作程序、基因工程研究内容,并了解基因重组的应用 本章重点：基因工程的研究内容和基本技术程序 本章难点：基因工程的基本技术程序 基因工程 福州一中 生物组 余洁 Genetic engineering 定义：又称为重组DNA技术，指将某些特定的基因或DNA片断，通过载体或其它手段送入受体细胞，使它们在受体细胞中增殖并表达的一种遗传学操作。 目的:是生产出符合人类需要的产品或创造出生物的新性状，并能稳定遗传。 一 基本工具 “分子手术刀”限制性内切酶 “分子缝合针”连接酶 “分子运输车”运载体：质粒 二、基因工程基本流程 1、DNA片段的取得（目的基因的分离和制备） 2、DNA片段和载体的连接——重组体DNA 3、重组DNA引入受体细胞 4、目的基因表达和检测 切 接 转 表达 1、DNA片段的取得（目的基因的分离和制备） 从基因所在的生物体直接取得：限制性内切酶（restriction enzymes） 基因文库，cDNA文库分离法（PCR反应合成） 化学合成法（DNA合成仪） cDNA文库与基因组文库 cDNA文库所含的克隆数是基因文库的十分之一，或更少 cDNA文库以mRNA为材料 cDNA文库的筛选比较简单易行 2、DNA片段和载体的连接——重组体DNA 载体：细菌中的质粒、温和噬菌体 1、能够在受体细胞中稳定保存并复制 2、有多个限制酶切位点 3、有启动子和标记基因 重组体DNA：载体DNA+引入的DNA 连接酶:平整末端;粘性末端 3、重组DNA引入受体细胞 受体细胞定义（receptor cell) 又称为宿主细胞或寄主细胞等 从试验技术上讲是能摄取外源DNA并使其稳定维持的细胞 从试验目的讲是有应用价值和理论研究价值的细胞 大肠杆菌、酵母菌等 转基因动植物：接受了外源基因，发生了性状改变的动植物 克隆（clones） 4、目的基因表达和检测 三. 基因工程的应用 植物基因工程：抗虫、病、逆植物的培育 动物基因工程：转基因动物的培育 药物基因工程：基因治疗 蛋白质工程：用基因工程生产自然界没有的蛋白质 内容总结 * Thanks！