琼脂糖凝胶电泳argaroseelectrophresis.pptVIP

一 .电泳的概念 带电质点在电场中向带有异相电荷的电极移动，这种现象称为电泳。 区带电泳是在半固相或胶状介质上加一个点或一薄层样品溶液，然后加电场，分子在支持介质上或支持介质中迁移。支持介质的作用主要是为了防止机械干扰和由于温度变化以及大分子溶液的高密度而产生的对流。 区带电泳使用不同的支持介质，早期有滤纸、玻璃珠、淀粉粒、纤维素粉、海砂、海绵、聚氯乙烯树脂；以后有淀粉凝胶、琼脂凝胶、醋酸纤维素膜，现在则多用聚丙烯酰胺（PAGE）和琼脂糖凝胶。 二. 实验目的 1 学习agarose gel electrophoresis的原理  及操作方法 掌握从琼脂糖凝胶中回收DNA片  段的方法。 2 学习SDS测定蛋白质分子量的原理。 3 掌握垂直板电泳的操作方法。 4 运用SDS测定蛋白质分子量及染色鉴定。 一、琼脂糖凝胶电泳Agarose gel electrophoresis 不仅仅是一种DNA分析手段 纯化特定DNA的常规手段 （一）琼脂糖凝胶电泳的原理 琼脂糖是由琼脂分离制备的链状多糖。其结构单元是D-半乳糖和3.6-脱水-L-半乳糖。许多琼脂糖链依氢键及其它力的作用使其互相盘绕形成绳状琼脂糖束，构成大网孔型凝胶。因此该凝胶适合于免疫复合物、核酸与核蛋白的分离、鉴定及纯化。 琼脂糖凝胶电泳分离核酸的基本技术在一定浓度的琼脂糖凝胶介质中，DNA分子的电泳迁移率与其分子量的