【优化方案】人教版高考生物选修专题基因工程的基本操作程序.分析报告.pptVIP

2．不同受体细胞的常用导入方法 生物种类 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 农杆菌转化法 受体细胞 转化过程 显微注射法 Ca2＋处理法 体细胞 受精卵 原核细胞 目的基因插入Ti质粒的T-DNA上→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA中→表达 目的基因表达载体提纯→取卵 (受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物 Ca2＋处理细胞→感受态细胞→表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子 特别提醒　目的基因能否稳定遗传的判断 目的基因能否在受体细胞内稳定保存并表达的关键是目的基因是否插入到受体细胞染色体上的DNA分子中。图中过程b与过程a相比，b会使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达，而a细胞分裂时，细胞质是不均分的，子细胞不一定含有目的基因。 (2014·山东济南高二检测)农杆菌是一种在土壤中生活的微生物，能在自然条件下感染植物，因而在植物基因工程中得到了广泛的运用。如图为农杆菌转化法的示意图，试回答下列问题： (1)一般情况下农杆菌不能感染的植物是____________，利用农杆菌自然条件下感染植物的特点，能实现________________________。具体原理是在农杆菌的Ti质粒上存在T-DNA片段，它具有可转移至受体细胞并整合到受体细胞________________上的特点，因此只要将携带外源基因的DNA片段插入到____________________(部位)即可。 单子叶植物 目的基因导入植物细胞 染色体的DNA T-DNA片段(内部) (2)根据T-DNA这一转移特点，推测该DNA片段上可能含有控制________________________(酶)合成的基因。 (3)图中c过程中，能促进农杆菌向植物细胞转移的物质是________类化合物。 (4)植物基因工程中除了农杆菌转化法之外，还可采取________________________。(至少写出两种) DNA连接酶、限制酶 酚 基因枪法、花粉管通道法 [解析]　(1)一般农杆菌不能感染的植物是单子叶植物，可感染双子叶植物和裸子植物。利用其感染性，可实现目的基因导入植物细胞。真正可转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体的DNA上的是农杆菌T-DNA片段，因此目的基因必须插入到该部位才能成功。(2)根据T-DNA这一转移特点，可以推测该DNA片段能控制合成DNA连接酶、限制酶以实现与双子叶植物细胞染色体DNA的整合。(3)植物细胞受伤后可产生酚类物质，促进农杆菌向植物细胞转移。(4)植物基因工程中除了农杆菌转化法之外，还有基因枪法和花粉管通道法等。 (1)能促进含目的基因的重组Ti质粒转入农杆菌中的常用方法是什么？ (2)怎样操作可促进单子叶植物受农杆菌的感染？ 提示：(1)用Ca2＋(或CaCl2溶液)处理可增加农杆菌细胞壁的通透性而达到促进含目的基因的重组Ti质粒转入农杆菌中的目的。 (2)可在单子叶植物受损处加涂酚类物质来吸引更多的农杆菌感染。 下列关于目的基因导入受体细胞的描述不正确的是(　　) A．基因枪法导入植物体细胞的方法比较经济有效 B．显微注射技术是转基因动物中采用最多的方法 C.大肠杆菌最常用的转化方法是使细胞的生理状态发生改变 D．农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞最常用的方法 解析：不同生物目的基因导入的方法不同，每种方法都有利有弊。目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法，该方法比较经济有效，基因枪法成本较高；目的基因导入动物细胞常用的方法是显微注射法；大肠杆菌细胞最常用的转化方法就是用钙离子处理细胞，使细胞的生理状态发生改变,完成转化过程。 A 目的基因的检测与鉴定 类型 步骤 检测内容 方法 结果显示 分子水平检测 第一步 第二步 第三步 目的基因是否进入受体细胞 DNA分子杂交技术(DNA和DNA之间) 目的基因是否转录出mRNA 分子杂交技术(DNA和mRNA之间) 目的基因是否翻译出蛋白质 抗原—抗体杂交技术 是否成功显示出杂交带 类型 步骤 检测内容 方法 结果显示 个体生物学水平鉴定 包括抗虫、抗病的接种实验，以确定是否有抗性以及抗性的程度；基因工程产品与天然产品的活性比较，以确定功能是否相同 特别提醒　在DNA分子、mRNA分子上检测目的基因是否插入、目的基因是否转录时，所用的探针都是用放射性同位素等标记的含有目的基因的单链DNA片段。 回答有关基因工程的问题： (1)构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生________末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生________(相同、不同)黏性末端的限制酶。 平 相同 (2)利用大肠杆菌生产人胰岛素时