浙科版选修问题释疑解析.pptVIP

浙科版选修3《现代生物科技专题》问题释疑 宁波效实中学 邵江樵 基因工程 5．PCR过程中退火（复性）温度的确定依据 * 2008－10 1．限制酶和质粒都是只存在与细菌中吗？ 不是。 不但细菌中存在限制酶和质粒，在酵母菌中也有限制酶和质粒。 基因工程 微生物中限制酶之所以不切断自身DNA，是因为微生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，对于外源入侵的DNA可以降解掉。 微生物在长期演化过程中，含有某种限制酶的细胞，其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列(类似于人体的凝集原于抗凝集素的关系)，或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基（A、C）上，使限制酶不能将其切开。这样，尽管微生物中含有某种限制酶也不会使自身的DNA被切断，并且可以防止外源DNA的入侵。 2．为什么微生物中的限制酶不剪切自身的DNA？ 基因工程 GAATTC CTTAAG 3．限制酶所识别的序列有什么特点？ 限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列(回文结构)的。 EcoRI 基因工程 4.限制酶的组合使用（双酶切）问题 (2008海南生物卷)图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI（G↓AATTC）、BamHI （G↓GA