HLA半相合免疫细胞治疗肿瘤疾病备案教材技术分析.docxVIP

HLA半相合免疫细胞治疗恶性肿瘤疾病 备案教材 北京普尔伟业生物科技有限公司 2014年10月9日 项目名称 HLA半相合免疫细胞对恶性肿瘤疾病的临床治疗 项目类型 临床应用的第三类医疗技术 项目目的 HLA半相合免疫细胞技术已广泛用于异基因骨髓移植后复发性白血病的免疫治疗，亦可用于难治性或复发性实体瘤，均取得了较为肯定的效果。本项目通过利用HLA半相合免疫细胞输注治疗恶性肿瘤疾病，以降低肿瘤复发转移率，提高长期生存率和生活质量。 项目背景 肿瘤是严重危害人民生活和健康的重大疾病之一，尽管肿瘤治疗中常用的手术、放疗、化疗等手段逐渐有了很大的改进，但肿瘤患者的五年生存率仍提高甚微。近年来，随着分子生物学和免疫学等学科的飞速发展，肿瘤生物治疗已成为继手术、放疗、化疗后的第四种肿瘤治疗模式，并以其安全有效、副作用小、适用范围广等优点逐渐被广大医务工作者和患者接受。 目前国内已有多家医院开展自体或异体免疫细胞治疗恶性肿瘤疾病的临床工作，自体多采用DC/CIK/CTL等细胞治疗方案，异体多采用白细胞输注等治疗方案。卫生部2009年3月16日颁布新的管理办法《医疗技术临床应用管理办法》，该办法自2009年5月1日起实施。对医疗机构开展生物治疗在政策上予以规范和支持，标志着我国已经认可生物治疗为恶性肿瘤的常规辅助疗法。 4.1 异基因供体白细胞输注技术 肿瘤的免疫治疗包括主动免疫治疗和过继免疫治疗。肿瘤的异基因免疫治疗是一种过继免疫治疗，异基因供体白细胞输注即是过继免疫治疗的一种。异基因供体白细胞输注主要是通过供体来源的免疫细胞所介导的移植物抗白血病（GVL）反应，清除体内残留的白血病细胞。Kolb等在1990年首次用供体白细胞输注治疗allo-BMT后复发的慢性粒细胞白血病患者，3例患者全部获得了血液学或细胞遗传学的CR。这提示着过继免疫治疗恶性肿瘤的可能性。许多研究也已肯定了DLI可通过诱导移植物抗白血病的产生而使复发患者再次获得缓解。供者白细胞输注（DLI）治疗造血系统肿瘤已被证明是有效并有广阔发展前途的方法。尤其应用于非骨髓移植患者时，充分利用于人体免疫细胞的移植物抗肿瘤（GVT）作用，舍弃了传统的异基因骨髓移植的潜在毒性。但此疗法目前尚存在如下不足：（1）GVT作用尚不够强，缓解维持时间短；（2）肿瘤细胞往往通过下调免疫应答相关分子表达发生免疫逃逸（3）HLA抑制的淋巴细胞供者来源困难。 4.2 HLA半相合技术 HLA半相合技术作为异基因免疫治疗的一部分，实际上也属于过继性细胞免疫治疗，它是通过诱导混合嵌合体或完全嵌合体的形成，产生移植物抗肿瘤效应（GVT）。其作用与输入的异基因免疫活性细胞所诱导的过继性免疫反应有关。由于供者淋巴细胞与宿主细胞表面的组织相容性抗原或肿瘤相关抗原不同而被识别激活，通过其自身的攻击能力和释放具有细胞毒作用的细胞因子对肿瘤细胞和宿主体内的正常细胞进行破坏性攻击，从而产生移植物抗肿瘤效应。 4.3 HLA半相合技术原理及临床研究情况 4.3.1 HLA半相合技术原理 HLA半相合免疫细胞输注实际上是一种过继性异基因免疫治疗，供者免疫细胞输注的作用与输入的异体免疫活性细胞诱导的过继性免疫反应有关，由于供者淋巴细胞与宿主细胞的表面组织相容性抗原和肿瘤相关抗原不同而被识别激活，通过其自身的攻击和释放具有细胞毒作用的细胞因子对肿瘤细胞和宿主体内的正常细胞进行破坏性攻击，从而产生移植物抗肿瘤效应和移植物抗宿主病（GVHD）和移植物抗肿瘤（GVT）效应。在供者淋巴细胞输注中，供者的CD4+T细胞主要是通过释放细胞因子如IL-2、IFN-γ等，激活单核-巨噬细胞、B细胞，并增强CD8+T细胞的杀伤功能而起到GVT作用。而CTL可通过识别抗原呈递细胞呈递的肿瘤特异性抗原或次要组织相容性抗原而被激活，并释放穿孔素或颗粒酶直接杀伤肿瘤细胞。异源反应性自然杀伤细胞（NK）也可以产生较强的GVT作用，NK细胞主要攻击受者的造血干细胞，因而不会引起GVHD。NK细胞还可以杀伤受者的树突细胞（DC），从而阻断T细胞介导的GVHD的发生，并可杀伤受者的淋巴细胞而有利于移植物的植活。 4.3.2 临床前安全性评价 异体白细胞输注抗肿瘤效应已经在动物实验中得到了证实。MMC灭活同种异体白细胞输注治疗B16-F10肺转移，结果显示，PBS组小鼠平均肺质量达0.64g；而经过新鲜制备或MMC灭活BALB/c小鼠脾细胞治疗的小鼠平均肺质量分别为0.26和0.35g；小鼠平均生存期分别较PBS组延长20.625和12.75d。灭活同种异基因白细胞输注治疗LLC自发肺转移，结果观察小鼠生存期显示，在肿瘤切除后69天时，PBS组小鼠已全部死亡，且死亡原因均为LLC肿瘤肺转移。相反，MMC灭活的BALB/c小鼠脾细胞治疗组小鼠