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大豆皂苷的提取工艺 1040521121 高康 简介 皂苷又名皂甙或皂素，是固醇类或三萜类化合物的低聚配糖体总称，因其水溶液能形成持久泡沫，象肥皂一样而得名，它广泛存在于植物和海洋动物体内。大豆皂苷 是一种常见的皂苷，它主要存在于豆科植物中。豆类植物种子中大豆皂苷的含量一般在0.62%-6.16%之间。人们对大豆的认识和利用有很久远的历史，但 对大豆皂苷的研究起步较晚，直到20世纪90年代中期DDMP大豆皂苷的发现，才引起人们的重视。 大豆皂苷的生理活性 抗脂质氧化、降低过氧化脂质作用、抗血栓作用、减肥作用、抗疲劳作用、抗癌作用、抗艾滋病毒作用等 调节免疫功能、防治心血 管疾病、护肝 大豆发酵食品——大酱、酱油、豆豉、腐乳等已有几千年的生产历史，是中国人日常饮食不可缺少的调味食品，现在已普及到日本、韩国、东南亚。传统的大豆发酵食品，由于发酵过程中微生物的作用，不仅解除了影响消化的胰酶抑制剂，也分解了肠道难吸收的棉籽糖和水苏糖，消除了豆腥味，并部分分解蛋白质使其易于消化，提高了其营养性；在一定盐浓度条件经微生物发酵，生成了嗜味氨基酸、小胎和风味物质，提高了其调味作用；在大豆发酵过程中生成很多生理活性物质，对人类健康、保健起到了重要的作用；而且这些大豆发酵食品保藏性能较好。 大豆皂苷的提取方法 大孔树脂吸附法 微波提取法 超声提取法 几种提取方法比较 原料 、 仪器与 试剂 大豆豆渣 : 市售 ( 烘干 );ZTC- l( 皂苷吸附树脂 )( 天津正天成澄清技术有限公司 ) 、 TU - 1810 紫外分光光度计 ( 北京普析通用仪器有限责任公司 ) 、 721 型分光光度计 ( 上海第三分析仪器厂 ) 、 R201 旋转蒸发器 ( 上海申生科技有限公司 ) 、 101A - 2 型干燥箱 ( 上海市实验仪器总厂 ) 、 WD- 700 型微波炉 ( 格兰仕有限责任公司 ) 、 MC 超声清洗机 ( 无锡超声电子设备有限公司 ); 齐墩果酸标准品 ( 中国药品生物制品检定所 ) 、 甲醇、乙醇、浓硫酸、 冰乙酸、 乙酸乙酯、 氯仿、 香草醛、 高氯酸、 异丙醇、 正丁醇 , 以上试剂均为分析纯。 大孔树脂吸附法称取 36 目的大豆豆渣 10 g, 用 40% 乙醇浸泡 , 在 70 ℃ 条件下回馏 6 h, 将混合物过滤 , 取上清液以 24 mL/min 的流速用 50% 乙醇上柱洗脱 , 得提取物。 有机溶剂提取法 称取 36 目的大豆豆渣 10g, 按 1：20 料液比加入 75% 乙醇溶剂 , 在 80℃ 条件下提取 2 次 , 每次时间 3 h, 合并提取液并真空抽滤 , 测定固形物质量。 微波提取法称取 36 目的大豆豆渣 10 g, 按 1 B 20 料液比加入 75% 乙醇溶剂 , 在微波功率270W 的条件下微波提取 90s, 真空抽滤 , 测定固形物质量。 超声波提取法称取 36 目的大豆豆渣 10 g, 按 1 B 20 料液比加入 75% 乙醇溶剂 , 以功率 50W 超声处理 25 min, 超声提取温度为 60 e , 过滤 , 旋转蒸发仪挥干 , 用甲醇溶解 , 过滤 , 定容 , 得供试品溶液。 大豆皂苷含量的测定方法 采用分光光度法测定豆渣提取物中皂苷的含量。 精确称取齐墩果酸标准品 1.0 mg 于 10 mL 容量瓶中 , 然后用甲醇溶解并定容 , 作为标准溶液 。 吸取标准溶液 1 mL 置于洁净的具塞试管中 ,70 ℃ 水浴蒸去甲醇。 加入 0.2 mL 新鲜配制的 5% 的香草醛 - 冰乙酸溶液和 0.8 mL 的高氯酸 , 振混摇匀后置于 60 ℃ 水浴条件下加热 15 min, 立即于冰水中冷却 5 min, 再加入冰乙酸 5 mL, 摇匀。 以未加入标准品的相同试剂作为空白 , 迅速在 547 nm 处进行吸光度测量 , 以吸光度 (A) 对标准品量 (C) 作图 , 得回归方程为 C= 0.4195+ 38.003 × A, 其中 :R = 0.9993, 线性范围 3.3333~ 16.6667 mg/L 。 样品测定时精密吸取提取液 0.1 mL, 其余操作同上 , 根据标准曲线回归方程 , 计算豆渣提取物中大豆皂苷含量。 1、 四种大豆皂苷提取方法液料比 对比 四种方法中除大孔树脂吸附法液料比为 1：10 外 , 其余三种均为 1 ：20 。 2、 四种大豆皂苷提取方法提取温度对比 四种大豆皂苷提取方法提取时所需温度分别为 : 大孔树脂吸附法 70 e 、有机溶剂提取法 80 ℃ 、 微波提取法和超声波提取法均为 60 ℃ 。 3、 四种大豆皂苷提取方法提取时间对比 四种大豆皂苷提