普通生物化学实验要点分析.ppt

三、实验仪器 电泳仪 电泳槽 注射器 长针头 吸管 培养皿 四、实验试剂 三羟甲基氨基甲烷(简称Tris) 贮备液的配制:按下表配制A、B、C、D、E、F各贮备液,然后冷藏于4℃条件下,以防变质。 染色液:0.05%氨基黑10B溶于7%醋酸溶液,或者用灵敏度高5倍考马斯亮蓝R250溶液染色。 脱色液:7%醋酸溶液。 电极缓冲液(pH8.3甘氨酸-Tris缓冲液):甘氨酸28.8g,Tris 0.6g加水定容至1000ml. 示踪剂:0.01%溴酚蓝溶液。 序号 A B C D E F 1mol/L盐酸 Tris TEMED ACr Bis (NH4)2S2O3 蔗糖 加水并稀释至 PH 48ml 36.6g 0.23ml 100ml 8.9 48ml 5.98g 0.46ml 100ml 6.7 28g 0.735g 100ml 10g 2.5g 100ml 40g 100ml 0.14g 100ml 五、实验步骤 1.制胶: 取一支长10cm左右的玻璃管,在一端套上乳胶帽。 1)7%聚丙烯酰胺凝胶(PH8.9,分离胶): 将试剂按A:C:H2O:F=5ml:10ml:5ml:15ml比例混合于一烧杯中.用滴管将分离胶加入玻璃管至3/4高度,表面再加少量水覆盖,在烘箱中25~35℃下聚合,当有界面出现时,表

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