血红蛋白的提取和分离(完美修改)解决方案.doc

专题五 课题3 血红蛋白的提取和分离 学习目标 1、理解凝胶色谱法、电泳法的基本原理，了解缓冲液的组成及其作用； 2、掌握血红蛋白的提取与分离的基本过程和方法。 一．基础知识 蛋白质的物化理性质： ，由此提取和分离各种蛋白质。 1．凝胶色谱法（分配色谱法）： （）概念：根据被分离蛋白质的 ，利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用，来分离蛋白质的有效方法。 （2）原理：分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢。 （3）凝胶材料：多孔性，多糖类化合物，如葡聚糖、琼脂糖。 （4）分离过程：（图5－13b） 混合物上柱→ → 分子流动快、 分子流动慢→收集 分子→收集 分子 （洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。） 2.缓冲溶液 （1）作用：能够抵制 的对溶液的 的影响，维持PH基本不变。 （2）缓冲溶液的配制：由弱酸和相应的强碱弱酸盐组成（如H2CO3－NaHCO3NaH2PO4/Na2HPO4等）。通常由种缓冲剂溶