基因工程复习一 将目的基因导入动物细胞 显微注射法(将基因表达载体提纯,用显微仪注射到受精卵中) 导入微生物 将目的基因导入微生物细胞 4检测和鉴定 Ca2+处理受体细胞成为感受态细胞,再进行混合。 筛选含有目的基因的受体细胞目的基因的表达 检测: 是否插入目的基因 是否转录 是否翻译 鉴定: 功能活性鉴定 抗性鉴定 分别提取什么进行检测 DNA 附着在膜上 硝化纤维素 加探针 报告基因(含荧光素分子) 变性 DNA杂交 (如检测SARS病毒等) a b c d ①检测是否插入目的基因,利用DNA分子杂交技术,目的基因DNA一条链(作探针)与受体细胞中提取的DNA杂交,看是否有杂交带。 ②检测是否转录出了mRNA,利用DNA分子杂交技术,目的基因DNA一条链(作探针)与受体细胞中提取的mRNA杂交,看是否有杂交带。 ③检测目的基因是否翻译成蛋白质。抗体与蛋白质进行抗原-抗体杂交,看是否有杂交带。 ④还可以进行个体水平的鉴定,根据其性状。 提示:①DNA分子杂交技术首先提取受体细胞中的DNA,然后高温解成单链,再与同位素标记的DNA探针杂交;②抗原-抗体杂交所用到的抗体是用表达出的蛋白质注射动物进行免疫,产生相应的抗体,并提取出而来的。 32.(8分)将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗, 饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备 过程相关的图和表。(
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