黄斑海蜇蛋白酶解工艺的研究介绍.doc

黄斑海蜇蛋白酶解工艺的研究 实验材料 本实验中所采用的黄斑海蜇购自广西省北海市。将黄斑海蜇用自来水浸泡24小时，不时搅拌并换水，再用流水清洗24小时后，打浆，挤压除水后，以备试验用。 DK-S24 电热恒温浴锅（上海精宏实验设备有限公司、太仓精密仪器设备有限公司）；SPECTRA MR 酶标仪（DYNEX）；美的微波炉（广州美的微波炉制造有限公司）；FA1004N 电子天平（上海精密科学仪器有限公司）；氮磷钙测定仪(上海洪纪仪器设备有限公司)。 血管紧张素转化酶(ACE)和马尿酰组氨酰亮氨酸(HHL)购自Sigma公司；蒸馏水；0.1 mol/LHCl溶液；0.2125 mol/LPH8.3 buffer；20 g/L硼酸；40%NaOH（质量比）；甲基红指示剂。胃蛋白酶，木瓜蛋白酶，风味蛋白酶和碱性蛋白酶，购自诺维信生物技术有限公司；胰蛋白酶，购自南宁东恒华道生物科技有限公司；其余试剂为分析纯。 实验方法 蛋白含量的测定 凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随着水蒸气蒸馏并被过量的酸吸收。由于蛋白质含氮量比较恒定，可根据其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。 取两支干净的消化管，一支加入黄斑海蜇预处理样品1.g，另一支不加蛋白粉作为空白对照，其余操