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第八章 印迹杂交技术 第一节 核酸分子杂交的基本原理 基本概念: 核酸分子杂交: 将一种核酸单链标记成为探针．再与另一种核酸单链进行碱基互补配对，可以形成异源双链核酸分子的过程。 杂交体:杂交形成异源双链核酸分子 核酸分子杂交技术: 单链的核酸分子在合适的温度和离子 强度下，通过碱基互补形成双链杂交体的 一类技术。 核酸杂交技术： 分子探针:带有某种标记物的分子 如核苷酸链片段 核酸分子杂交的基本原理 DNA变性: 融解温度(Tm值):50％DNA变性的温度 DNA复性: 核酸杂交： 第二节 探针与标记 一、探针的基本条件 ①带有标记物，便于分析杂交体 ②为单链核酸，双链核酸探针使用前需变性解链 ③具有高度特异性，只与待测核酸杂交 ④探针序列通常是基因编码序列，因为非编码序列特异性低 ⑤探针标记灵敏度高而稳定，标记方法简便而安全 二、探针的种类 1.基因组DNA探针 2. RNA探针 3. cDNA探针 4.寡核苷酸探针 ⒈ 基因组DNA探针 基因组DNA探针多为某一基因的全部或部分序列，是最常用的DNA探针。 注意:由于真核生物基因组中存在高度重复序列，制备基因组DNA探针应当尽可能