高级微生物期末试题技术分析.docVIP

y结合自己的专业，围绕一种微生物资源的开发，设计一种产品，说明理由，产品的技术方案，及质量标准。 SFTVS重组活载体疫苗 发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)是近年在我国新发现的一种布尼亚 病毒,病人的主要症状为发热、血小板减少、白细胞减少、消化道症状和多脏器 功能损伤。目前已在河南、湖北、山东、江苏、安徽、辽宁等16个省发现发热 伴血小板减少综合征(SFTS)病例,病人平均死亡率在10%左右。目前尚没有 有效的疫苗可以使用,研制安全有效的预防用疫苗成为了应对SFTS疫情的迫切 需要。 重组活载体疫苗是利用微生物做载体，将保护性抗原基因重组到微生物体中，使用能表达保护性抗原基因的重组微生物制成的疫苗。 优点：疫苗多为活疫苗，重组体用量少，抗原不需纯化，载体本身可发挥佐剂效应增强免疫效果 一、疫苗制备 第一步是分离目的基因，获得目的DNA片段的方法主要有两种，一是直接从细胞基因组中分离，二是人工合成。 ?第二步是将DNA片段和载体在体外连接重组，成为重组DNA分子，多采用连接酶的方法连接。 第三步是基因克隆，即将重组体DNA分子转入大肠杆菌中增殖。 第四步是目的基因克隆的筛选与鉴定，即从大量携带重组体DNA分子的细胞中分离出带目的基因的细胞。 1）在含有一定浓度抗生素的选择培养基上筛选 2）酶切鉴定， 3——）PCR鉴定，测序分析 第五步是目的基因诱导表达 6、SDS-聚丙烯酰