基因工程复习刘慧慧技术分析.docx

1.基因工程（分子克隆技术）： 指将一种供体生物体的目的基因与适宜的载体在体外进行拼接重组，然后转入另一种受体生物体内，使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新的基因产物或产生新的遗传性状的DNA体外操作程序。 2.基因工程的基本流程： 3.流程图 1）目的基因的分离、获取与制备 2）目的基因与载体连接构建成为重组载体分子 3）重组DNA分子导入受体细胞 4）外源目的基因阳性克隆的鉴定和筛选 5）外源目的基因的表达4. II 型限制性核酸内切酶的基本特性： （1）识别双链DNA分子中4 - 8对碱基的特定序列 （2）识别切割序列呈典型的旋转对称型回文结构 （3）大部分酶的切割位点在识别序列内部或两侧 5.同位酶： 识别相同的序列但切割位点不一样。（如Sma I和Xma I，识别的序列相同，都为CCCGGG，而切割位置不同，Sma I为错切C↓CCGGG，而Xma I为平切CCC↓GGG。） 同尾酶： 识别位点不同但切出的DNA片段具有相同的末端序列。 P17 同裂酶： 来源不同，识别位点和切割位点均相同的酶。 6.星号活性： 限制性内切核酸酶的识别位点是在特定的消化条件下测定的，当条件改变时，有些酶的识别位点 也随之改变，可能切割一些与特异识别序列相类似的序列，这种现象称为星号活性。 7.影响限制性核酸内切酶活性的因素（6）：