CHIP染色质免疫共沉淀实验方法简介.pptVIP

染色质免疫沉淀实验(CHIP) 研究体内DNA－蛋白质相互作用的重要工具。 它不仅可以灵敏地检测目标蛋白与特异DNA 片段的结合情况，还可以用来研究组蛋白与基因表达的关系。 Chi SW, Zang JB, Mele A, Darnell RB. Argonaute HITS-CLIP decodes microRNA-mRNA interaction maps. Nature. 2009 Jul 23;460(7254):479-486. * * Chromatin Immunoprecipitation Assay (ChIP) 染色质免疫沉淀实验 基因表达:反式因子和顺式作用元件之间相互作用。 真核生物的基因组DNA以染色质的形式存在。 研究蛋白质与DNA在染色质环境下的相互作用是阐明真核基因表达机制的基本途径。 概述 原理 方法 比较 举例 ?基因表达调控 功能基因组学? 概述 原理 方法 比较 举例 CHIP原理 在活细胞状态下固定蛋白质－DNA复合物 将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段 通过免疫学方法沉淀此复合体，特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段 对目的片断的纯化与检测 概述 原理 方法 比较 举例 概述 原理 方法 比较 举例 操作步骤 一、固定 在活细胞状态下，用甲醛固定蛋白质－DNA复合物，然后用化学（微球菌酶）或者机械（超声波）的手段