2014级硕士研究生细胞培养与细胞操作资料.doc

细胞培养的概念 指从体内取出组织，细胞制成单个细胞悬液，在体外模拟体内生理环境，在无菌，适当温度和一定营养条件下，使其生存和生长，并维持其生存和生长的特性，继续存活与增值。培养过程中不在形成组织。也可用已经建系形成的细胞株（系）复苏后继续培养，多是癌细胞，其目的是进行后续的生命科学研究，如细胞操作等。 利用细胞培养技术进行生命科学研究的优点 1研究的对象是活的细胞 2研究的条件可以人为控制 3 研究的样本可以达到均一性 4 研究的内容便于观察、检测和记录 5 研究的范围比较广泛 6研究的费用相对较经济 试述影响体外培养细胞生长的各种因素。 1 无毒无污染的培养环境 离体细胞缺乏防御能力，在有污染物和毒性物质的环境中生存可造成细胞生物学特性改变，甚至中毒死亡。生物、物理及化学因素都可能入培养环境造成污染。 2 恒定的生长温度 组织和细胞培养的最适温度为35～37℃，培养细胞对低温的耐受力比对高温强 3 合适的气体环境 开放培养时一般把细胞置于95%空气加5% CO2混合气体环境中 4 pH缓冲系统 培养环境需保持pH值恒定，大多数细胞的适宜pH值为7.2～7.4。细胞耐酸性比耐碱性大一些，在偏酸环境中更利于细胞生长。一些细胞喜欢偏碱环境，如：成纤维细胞，最适pH是7.4～7.6 5 理想的渗透压 人血浆渗透压290mmol/L，是培养人体细胞的理想渗透压，鼠细胞渗透压在320mmo