实验六：聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳过氧化物酶同工酶实验创新.docVIP

班级：植物142 姓名：刘国强 学号：1401080229 实验六：同工酶是指能催化同一种化学反应， 但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。它们是DNA 编码的遗传信息表达的结果。研究表明，同工酶与生物的遗传、生长发、代谢调节及抗性等都有一定的关系。因此，测定同工酶在理论上和实践上都有重要的意义。用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定同工酶，方法简便、灵敏度高，重现性强，测定结果便于观察、记录和保存过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶。它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都关系。在植物生长发育过程中它的活性不断发生变化。因此，测定这种酶的活性或其同工酶的变化情况，可以反映某一时期植物体内代谢的变化。 本实验采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳技术，分离小麦和根部的过氧化物酶同工酶，通过染色方法显示出酶的不同区带，以鉴定小麦幼苗过氧化物酶同工酶。通过本实验，主要要掌握电泳术的原理、方法、设计、装置、凝胶配制等问题，熟悉所有的操作过程、采用不连续聚丙烯酰胺凝胶分离幼叶叶片根部的过氧化物酶同工酶。利用在分解过氧化氢的过程中产生自由氧基，从而将联大茴香胺连接到过氧化物酶分子上，使之呈现棕褐色，将电泳后的凝胶置于含有过氧化氢的联大茴香胺染色液中浸泡，过氧化酶同工酶的部位便可以观察到褐色谱带。通过谱带的数量、位置获得相信息。1． 实验