相位层析显微镜
摘要:本文介绍了在多个角度使用相移激光干涉显微术得到定量的活细胞或组织折射率的三维分布的技术。我们展示细胞和多细胞组织的层析成像,和基于时间变化的细胞的结构。我们的结果可以定量分析样品带来的在高分辨率显微镜下的像差,而且,在组织散射中也有很多的应用。
关键词:激光干涉显微术;折射率;三维分布。
引言
高分辨率光学显微镜不仅受到光的衍射性质的局限,并且由于样品的光学不均匀性,其分辨率也受很大的影响。如果能够精确的测量由折射率变化造成的像差,自适应光学[1]和反褶积技术[2]可以很好的用来纠正样品所引起的像差。但是,所有的修正手段或技术都需要样品折射率的三维定量分布场。
折射率展示了其在分析细胞结构的一个独特视角,在分析细胞或组织的光散射效应,单分子光镊,流式细胞仪,全内反射显微镜,光与细胞或组织相互作用等的各个研究领域中,样品的折射率分布均有重要的应用。
传统的细胞折射率测量技术只能得到单细胞的平均折射率,而且忽略了亚细胞结构带来的空间变化。此外,测量样品需要浸泡在不同折射率的折射率液中,并且需要使用相衬显微镜[3]进行观察。这一过程极其繁琐,而且受到一些限制:由于测量细胞需要浸泡在折射率液中,必须选择合适的折射率液从而不使细胞的形貌产生改变。最近,已经报道了使用显微镜原理精确测量样品平均折射率的技术[4,5],其能够定量精确测量由于样品带来的相移。但是三维空间的折射
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