凝血酶蛋白的稀土特异性标记与绝对定量.docVIP

凝血酶蛋白的稀土特异性标记与绝对定量 摘 要：采用夹心法，用稀土离子标签标记凝血酶蛋白进行定量分析。通过选择合适的适配子，将MMF-DOTA-La标签接到适配子上,另选一种适配子接上包覆BSA的磁性纳米粒子。血清中，两种适配子特异性的选择结合到目标凝血酶蛋白上。磁性纳米粒子可以实现目标蛋白在磁场中快速分离,热解除去纳米粒子，将目标物质用ICP-MS检测La离子浓度。实验发现，稀土标签具有很高的灵敏度，离子检测强度和目标蛋白浓度具有很好的线性相关。 关键词：稀土，凝血酶，适配子，夹心体 1背景介绍 1.1 凝血酶蛋白作用及定量方法 1.1.1凝血酶 凝血酶是一种多体络合酶，参与多种酶促反应和细胞反应，可以促进纤维蛋白原转变为纤维蛋白，起到凝固血液作用。局部应用后作用于病灶表面的血液很快形成稳定的凝血块，用于控制毛细血管、静脉出血，或作为皮肤、组织移植物的黏合、固定剂。凝血酶对血液凝固系统的其他作用尚包括诱发血小板聚集及继发释放反应等。临床上，个体血液中凝血酶的含量是一项重要的生理指标，反映个体的自我止血能力，可以在手术中为医生提供参考。但是从目前的医学条件来看，尚无可以直接从病人体中检测凝血酶即时浓度的方法。一般的，通过检测血液中TAT （thrombin-antithrombin-complexes）的含量来间接的了解凝血酶的浓度，但是由于TAT的半衰期远远大于凝血酶半衰期，这