C57BL／6J小鼠颈动脉粥样硬化斑块模型的建立与研究介绍.docVIP

实验动物学设计大纲 实验名称： C57 BL／6J小鼠颈动脉粥样硬化斑块模型的建立与研究 课题来源：自选 设计班级：2014级研究生班 设计人员：廖志林 设计日期：2015年6月20日 指导老师：陈晓平 四川医科大学实验技术教研室 2015年制 一.实验设计的目的意义,实验设计的目的意义，国内外研究现状，存在的问题，解决问题的思路 目的与意义: 采用易得的C57 BL／6JC57 BL／6JＡpoＥvon der Thusen等的方法。本研究对普通的C57 BL／6J 参考文献 ［］［］［］Libby P,Okamoto Y,Rocha VZ,et al.Inflammation in atherosclerosis:transition from theory to practice[J]．Circ J ,2010,74(2):213-220 ［］Satoh K, Matoba T,Suzuki J,et al. Cyclophilin A mediates vascular remodeling by promoting inflammation and vascular smooth muscle cell proliferation[J]. Circulation,2008,117(24):3088-3098 ［］Satoh K , Nigro P , Matoba T ,et al. Cyclophilin A enhances vascular oxidative stress and the development of angiotensinⅡ－induced aortic aneurysms[J].Nat Med,2009,15(6):649-656 ［］Von der Thüsen J H ,van Vlijmen BJ,Hoeben RC,et al.Inducton of atherosclerotic plaque repture in apolipoprotein E-/- mice after adenovirus –mediated transfer of p53[J]．Ciculation,2002,105(107):2064-2070. ［］Wang B,Qian H,Yang H,et al.Regression of　atherosclerosis plaques in apolipoprotein E-/- mice after lentivirus- mediated RNA interference of CD40[J].Int J Cardiol,2013,163(1):34-39 　C57 BL／6J小鼠产生颈动脉粥样硬化斑块。 拟解决的关键问题:怎样把握好小鼠进行套管所形成斑块的进程 （二）实验设计 1、实验动物设计（遗传背景，微生物学质量，育种繁殖，饲养管理，动物模型，实验动物学技术） 1.1遗传背景: 1921年Little由Abby Lathrop得到动物后开始近亲交配，育成数个近交系。雌鼠57与雄鼠52交配而得C57BL,用雌鼠58与雄鼠52交配即得C58,1937年分开C57BL/6及C57BL/10两系。我国国家啮齿类实验动物种子中心上海分中心于2002年自JAX引进该品系。 1.2微生物学质量:清洁级(CLA)C57BL/6J小鼠，雌雄各半 1.3 C57 BL／6J小鼠育种繁殖 1.3.1繁殖方法:近交繁殖， 1.3.2 初始动物的选择：挑选一对或几对具有育种目标要求的性状的全同胞兄妹 1.3.3 性别鉴定： 1、雄鼠的生殖器距肛门较远 2、雄鼠生殖器与肛门之间长毛 3、雄鼠的生殖器较雌鼠大 4、雌鼠乳头较雄鼠明显 1.3.4 性成熟期: 35-55日龄；实配年龄：60日龄左右；成熟时体重：20克以上 1.3.5 发情鉴定: 看雌鼠外阴和阴道口，当外阴充血肿胀、阴道口张开且呈干燥状态，可确认为动情期雌鼠。同时可作阴道涂片观察，涂片上有大量角化上皮细胞和少量有核上皮细胞，细胞分散未成团成堆，即为动情期雌鼠。 1.3.6 配种：动情前期交配 1.3.7 交配形式:近亲繁殖（全同胞兄妹交配） 1.3.8 妊娠诊断：摸胎法、阴道涂片法、外形涂片法、直肠检查法 1.3.9 育种代数：作为亲本的全同胞兄妹（初始动物）记为0代，按雌雄1：1进行交配，所生后代记为第1代，从中又选留满意的一对或几对全同胞兄妹作亲本，按雌雄1：1进行交配，以此类推，直到20代以上 1.3.10 个体选择：选择留繁殖力强，生活力强,目标形状优良的个体 1.3.11 保种方法：修饰平行线系统 1.3.12 扩大繁殖生产方法：交通信号灯方法 1.4 饲养管理: C