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Agilent LC/MSD Trap 操作概述 ——刘杨 介绍 LC/MSD TRAP 系统综述 调谐与校正 电离影响因素与溶液化学 启动与关闭LC/MSD TRAP LC/MSD TRAP 分析方法的建立 离子阱数据采集 定性分析和数据处理 质谱的特点 样品必须离子化 离子化的化合物才能被移动、控制和质量分析 必须具有一定的真空 离子飞行的平均自由程需最大化 理论上，真空度越高越好 必须测量离子的质量数 即质荷比（m/z) 质谱仪的组成单元 LC/MSD TRAP 系统概述 在这一部分，我们来认识和了解： 不同离子源：电喷雾、大气压化学电离和大气压光致电离 离子阱质量分析器的基础和检测器 真空系统如何工作 由质谱得到的信息种类 大气压电离质谱仪(API-MS) 电喷雾(ESI): 其电离过程通过电场产生带电液滴，接着样品离子通过离子蒸发后做质谱分析。雾化通常通过气动辅助。 大气压化学电离(APCI): 气相化学电离(CI)过程。溶剂或反应气在电晕针的作用下先带电，再转移给化合物形成离子。 大气压光致电离(APPI): Krypton氪灯产生的紫外光电离气相样品或参加随后的气相反应。 复合源（MMI）：--ESI, APCI, or (ESI+APCI) Relative Applicability of LC/MS Techniques LC/MSD TRAP 的主要组成 大气压电离-电喷雾电离源API-Electrospray Ion Source 设置合适的喷雾室参数非常重要 1.干燥气设置对色谱图的影响 2.干燥气设置对质谱图的影响 APCI Ion Source APCI 喷雾室的设置 （ 注意区别SCI喷雾室的参数设置） 去溶剂装置和毛细管 附： 积碳现象：电晕针用久后出现异常放点，基线会非常不稳，此时可用砂纸打磨两下即可。 仪器使用过程中，需要观察以下情况是否正常： 1.喷针喷雾是否均匀细密 2.参数设置中，电的设置是否合适 八级杆 离子阱中氦气的作用： 冷却离子、集中离子 碰撞气 通过离子阱后，离子按照荷质比从小到大发射出来 电子倍增器（检测器） 离子阱的LC/MS/MS工作步骤 二、调谐与校准 三、电离影响因素和溶液化学 ESI APCI 样品 ? 在溶液中为离子态: 儿茶酚胺、硫酸酯共轭物、丁基胺 ? 有可诱导电离的化合物： ? 含杂原子的化合物：氨基甲酸酯类， ? 溶液中带多电荷：蛋白质、多肽、低聚核甘酸 溶液化学参数 ? 流速 ? 样品的pK, 溶液pH ? 溶液导电性 应避免的样品 ? 尤其非极性的样品 离子模式选择 1.正离子ES模式 适合碱性样品；有杂原子（N多于O）可接受H+、Na+、NH4+；酸性流动相 2.负离子ES模式 适合于酸性样品；含强负电性基团，有杂原子（N少于O）可失去质子；中性偏碱性流动相 3.可正可负：比较灵敏度，看哪种裂解最具特征 离子源的选择： 启动和关闭安捷伦离子阱质谱 LC/MSD Trap：分析方法的建立 小结： 离子阱的数据采集 质谱控制界面 Tune界面 定性分析和数据处理 放大并记录通过质量过滤器的离子数目。 电子倍增器的寿命取决于： 1.打击在它上面的离子数目 2.它本身所加的电压高低 3.自身老化（3-5年） 注意： 在调谐校准前，先确定真空系统已经达到要求。 实验步骤： 甲醇是质子性溶剂，乙腈含碳多。 样品 ? 分子量和极性中等的化合物： 脂肪酸, 邻苯二甲酸酯类. ? 不含酸性和碱性位点的化合物（碳氢化合物、醇、醛、酮和酯） ? 含有杂原子的化合物：脲、氨基甲酸酯 ? 电喷雾响应不好的样品 溶液化学参数 ? 较ES对溶液化学作用不灵敏 ? 较ES更耐大的流速 ? 适用ES不宜的一些溶剂 应避免的样品 ? 在气化过程中热不稳定的化合物 最好用流动相溶解样品！ * * 毛细管帽、半圆形电极、对电极、喷雾挡盖 真空状态与大气压 调谐液的保存 水多，流速大时多给雾化气，加大干燥气的流速和温度。实验过程中若气不太够时，在重现性要求不高时可以增加温度，降低流速。三乙胺是很强的气象碱，在离子源里会争夺电荷，所以最好不用，102的基峰很明显，如果有102峰就停工，先洗源再用甲酸乙酸甲醇乙腈来洗，流动相中如果有较强的有机碱，最高多冲会喷针 BPS形成的中性离子对很稳定，常不用 尽量避免钠钾里 选择ESI原形成多电化合物，ESI原液相是反相色谱柱才行，如果是正相色谱要换为APCI原，正反相替换时要用异丙醇来置换。 A